[发明专利]一种检测猴痘病毒的试剂及其应用

说明书

本发明提供了一种检测猴痘病毒的试剂及其应用。本发明所述检测猴痘病毒的试剂包括：针对猴痘病毒A27L基因的RAA检测引物组；和/或针对猴痘病毒F3L基因的RAA检测引物组。本发明的检测方法具有检测时间短、灵敏度高、特异性强、操作简单等特点，只需在37～42℃条件下反应5～15min便可分析结果；对于猴痘病毒(Monkeypox virus)快速检出具有非常重要的意义，具有较大的应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学检测技术领域，更具体的说是涉及一种检测猴痘病毒的试剂及其应用。

背景技术

猴痘病毒(Monkeypox virus)属于痘病毒中的正痘病毒属，是一种双链DNA病毒，与天花病毒关系较近。猴痘病毒感染人体后的潜伏期为5至21天。其临床表现主要包括发热、剧烈头痛、淋巴结肿大、背痛、皮疹、肌肉痛等。作为一种人畜共患病，猴痘病毒传播方式主要分为两种，由动物传播到人类和人传人。松鼠、袋鼠、睡鼠或其他啮齿动物身上均可感染猴痘病毒。人类主要通过被已感染的动物咬伤，或直接接触被感染动物的血液、体液而感染猴痘；或者直接、长时间面对面与患者接触，通过呼吸飞沫、体液以及病毒污染的物品传播。

鉴于猴痘病毒的流行及其高致死性，一种快速、特异性的诊断方法，在早期控制疾病的传播十分重要。面临发病例数不断增加，基层医院实验室检测条件有限等问题，开发一种简单、快速和特异性高的诊断方法是非常有必要的。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种检测猴痘病毒的试剂及其应用。

本发明的一个目的在于提供一种检测猴痘病毒的试剂。

本发明的另一个目的在于提供用于检测猴痘病毒的试剂盒。

本发明的另一个目的在于提供所述试剂或试剂盒在检测猴痘病毒中的应用。

一方面，本发明提供一种检测猴痘病毒的试剂，该试剂包括：

针对猴痘病毒A27L基因的RAA检测引物组；和/或

针对猴痘病毒F3L基因的RAA检测引物组。

根据本发明的具体实施方案，其中，所述A27L基因包括如SEQ ID NO:1所示的序列；

所述F3L基因包括如SEQ ID NO:8所示的序列。

根据本发明的具体实施方案，其中，所述针对猴痘病毒A27L基因的RAA检测引物组包括如SEQ ID NO.2所示序列的引物和如SEQ ID NO.3所示序列的引物：

5’-TCAGCGATTCCTATAGCCGTTCTTGTATTTGTG-3’(SEQ ID NO.2)；

5’-GTCTAAGCCTATTACTAATACTGGTATTGA-3’(SEQ ID NO.3)。

根据本发明的具体实施方案，其中，所述试剂还包括针对猴痘病毒A27L基因的探针，所述探针包括如SEQ ID NO.4所示序列的探针：

5’-CTAATGGATTGTATGGCTTGATAGCATCATCTTTATCATTATTAGGTGG-3’(SEQ ID NO.4)；

优选地，所述探针还包括在SEQ ID NO.4所示序列基础上经修饰的探针。

优选地，所述修饰包括：探针序列5’端碱基采用荧光报告基团修饰，同时探针序列3’端碱基采用荧光淬灭基团修饰；

优选地，所述修饰包括：

探针序列离5’端碱基数32bp的位置上的碱基T采用荧光报告基团FAM修饰，探针序列离5’端碱基数34bp的位置上的碱基T用荧光淬灭基团BHQ修饰，探针序列离5’端碱基数33bp的位置上的碱基T用四氢呋喃残基(THF)替换。