[发明专利]基于NRAS基因Q61K突变的肿瘤新抗原多肽及其应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种基于肿瘤驱动基因NRAS上Q61K突变相关的肿瘤新抗原多肽及其应用。本发明要解决的技术问题是针对现有技术中的不足，提供一种基于MHC‑II类分子的针对肿瘤驱动基因NRAS的Q61K突变的特异性免疫治疗方案。本发明解决上述技术问题的技术方案是提供一种基于NRAS基因Q61K突变的肿瘤新抗原多肽。该抗原肽的氨基酸序列为GKEEYSAMRDQYMRT。本发明的抗原肽能够显著激活人体特异性针对NRAS突变的T细胞，以增加T细胞对NRAS突变肿瘤细胞的杀伤能力，能够制备预防和治疗NRAS突变肿瘤的药物，尤其是用于制备肿瘤细胞疫苗。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种基于肿瘤驱动基因NRAS的Q61K突变相关的肿瘤新抗原多肽及其应用。

背景技术

人类RAS(Rat SArcoma，大鼠肉瘤)肿瘤驱动基因包括HRAS、KRAS和NRAS基因，可在约30％的恶性肿瘤中发生突变。NRAS在质膜中的激活会导致蛋白质磷酸化和信号转导，促进细胞生长、增殖和分化。其激活突变主要发生在G12、G13和Q61位点，与G12，G13号位点突变不同的是，Q61位置的突变会加强GTP的结合，从而减少GTP的水解，最后都会导致RAS的过度激活、产生促癌信号以及耐药。NRAS Q61K突变主要出现在黑色素瘤、结直肠癌、甲状腺癌和肺癌等多种类型的肿瘤中。但是，由于NRAS蛋白本身具有特殊性，开发靶向NRAS的治疗手段非常具有挑战性。因此，尽管经过30多年的深入研究，有效的抗RAS疗法仍未进入临床。

肿瘤的免疫治疗被认为是继手术、放疗、化疗和小分子靶向治疗之后的新一代的肿瘤治疗方法，它与之前传统治疗方法的不同之处在于：免疫治疗将治疗手段从药物直接杀伤肿瘤细胞转到增强免疫细胞，通过提高患者自身的抗肿瘤免疫能力来治疗肿瘤，与传统治疗相比具有杀伤精准、副作用小、疗效持久、个性化程度高等优势。此外，机体免疫系统具有免疫记忆的特性，因此免疫治疗可以帮助患者形成记忆型免疫，在防止肿瘤复发和转移上具有显著优势。基于肽的疫苗将肿瘤突变肽提供给MHC分子，以诱导产生特异性和长期记忆T细胞来对抗肿瘤。肿瘤抗原通常被认为是内源性抗原，与MHC I类分子结合，刺激CD8+细胞毒性反应。还有小部分较大的多肽与MHC II分子结合，专门刺激CD4+T辅助细胞。

鉴于NRAS突变在肿瘤中的高频率，其已经成为免疫治疗的潜在靶点。有研究发现突变的NRAS肽可诱导特异性的CD8+和CD4+T细胞抗RAS免疫应答，且NRAS突变肽具有增强的免疫原性。因此，靶向NRAS突变肽的疫苗可作为NRAS突变肿瘤患者的特异性免疫治疗手段。已有的研究中，针对NRAS的研究主要集中在MHC-I类分子中，例如研究者发现，在HLA-A*01:01基因型的黑色素瘤病人中，使用针对RAS.Q61K的新抗原(ILDTAGKEEY,SEQ ID No.31)可以有效地激活患者体内的T细胞并对肿瘤进行杀伤(Peri et.al,J Clin Invest.2021Oct15)，但是其仅针对包含HLA-A*01:01基因型的病人。而基于MHC-II类分子的RAS新抗原目前还未见报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术中的不足，提供一种基于MHC-II类分子的针对肿瘤驱动基因NRAS上Q61K突变的特异性免疫治疗方案。

本发明解决上述技术问题的技术方案是提供一种基于NRAS基因Q61K突变的肿瘤新抗原多肽。该抗原肽的氨基酸序列为GKEEYSAMRDQYMRT(SEQ ID No.17)。

或者，为上述各多肽的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加至少一个氨基酸所得的功能相同或者相似的多肽。

其中，上述的相同或相似的功能是指抗原多肽能激活HLA分型为HLA-DRB1*09:01且伴随有NRAS的Q61K突变的患者产生特异性的针对具有NRAS Q61K突变的肿瘤的T细胞。

本发明还提供了上述肿瘤新抗原多肽在制备可诱导产生特异性细胞毒性T细胞克隆的免疫活性调节剂中的应用。