[发明专利]微生物的检测装置和检测方法

权利要求书

1.一种微生物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

将待测样本采用液滴生成技术形成多个液滴，每个所述液滴中包裹有包含PCR反应剂和至多一个微生物的反应液；所述PCR反应试剂包括用于扩增目标微生物的基因片段的引物和与所述引物对应的检测探针，所述检测探针上连接有信号物质；及

将各个所述液滴中的反应液进行裂解反应和PCR反应后，检测反应结束后的液滴中信号物质的信号强度，并根据所述信号强度确定含有目标微生物的液滴数量以确定待测样本中的目标微生物的数量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述信号物质包括荧光基团，所述荧光基团包括FAM、HEX、VIC、CY5、ROX、Texsa Red、JOE及Quasar705中的一种。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述PCR反应试剂包括用于扩增目标微生物的不同基因片段的引物和对应的检测探针。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，不同基因片段的检测探针上连接的信号物质相同，且不同的基因片段的检测探针的浓度不同；

或者不同基因片段的检测探针上连接的信号物质不同。

5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述PCR反应试剂还包括缓冲剂、扩增酶和dNTP。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述液滴的平均直径为100μm～120μm。

7.一种微生物的检测装置，其特征在于，包括：

液滴生成机构，用于将待测样本制成多个液滴，每个所述液滴中包裹有包含PCR反应剂和至多一个微生物的反应液；所述PCR反应试剂包括用于扩增目标微生物的引物和与所述引物对应的检测探针，所述检测探针上连接有信号物质；

PCR反应机构，用于对各个所述液滴中的反应液进行裂解反应和PCR反应；

检测机构，用于检测PCR反应结束后的液滴中的信号物质的信号强度；

数据采集与分析机构，与检测机构通讯连接，所述数据采集与分析机构用于采集所述检测机构的检测结果并进行统计分析。

8.根据权利要求7所述的检测装置，其特征在于，所述信号物质为荧光基团，所述检测机构包括激光光源模块、第一二向色镜、反射镜、非球面透镜、第二二向色镜、第一检测模块和第二检测模块；

激光光源模块用于提供激光；

所述激光光源模块、所述第一二向色镜、所述反射镜和所述非球面透镜形成用于激发液滴发出荧光的第一光路；

所述非球面透镜、所述反射镜、所述第一二向色镜和所述第二二向色镜形成供所述第一检测模块或第二检测模块检测所述荧光的第二光路；

所述第一检测模块和所述第二检测模块分别独立地与所述数据采集与分析机构通讯连接，所述数据采集与分析机构用于收集并分析所述第一检测模块和所述第二检测模块的检测结果。

9.根据权利要求8所述的检测装置，其特征在于，所述第一检测模块包括第一滤光片、第一球面透镜、第一小孔和第一荧光探测器，经所述第二向色镜反射的荧光依次经过所述第一滤光片、所述第一球面透镜和所述第一小孔后被所述第一荧光探测器检测，所述第一荧光探测器与所述数据采集与分析模块通讯连接；

所述第二检测模块包括第二滤光片、第二球面透镜、第二小孔和第二荧光探测器，经所述第二向色镜透射的荧光依次经过所述第二滤光片、所述第二球面透镜和所述第二小孔后被所述第二荧光探测器检测，所述第二荧光探测器与所述数据采集与分析模块通讯连接。

10.根据权利要求8或9所述的检测装置，其特征在于，所述激光模块包括激光器、激光模块小孔和激光模块滤光片，所述激光器产生的激光依次经所述激光模块小孔和所述激光模块滤光片后到达所述第一二向色镜，并经所述第一二向色镜和所述反射镜反射、所述非球面透镜聚焦后形成用于激发液滴发出荧光的激光；

或者，所述液滴生成机构为微流控芯片。