[发明专利]提高副干酪乳杆菌JY062胞外多糖产量的制法有效

专利信息
申请号: 202211081420.8 申请日: 2022-09-06
公开(公告)号: CN115161364B 公开(公告)日: 2022-12-09
发明(设计)人: 姜毓君;满朝新;张宇;杨鑫焱;苗超 申请(专利权)人: 东北农业大学
主分类号: C12P19/04 分类号: C12P19/04;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/225
代理公司: 南京群迈知识产权代理有限公司 32690 代理人: 安士影
地址: 150030 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 提高 干酪 杆菌 jy062 多糖 产量 制法
【权利要求书】:

1.一种提高副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)JY062胞外多糖产量的制法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤一,从基因层面和表型微生物碳源利用层面确定副干酪乳杆菌JY062生成胞外多糖可利用的碳源;所述可利用的碳源包括甘露糖、海藻糖、半乳糖、果糖、葡萄糖和乳糖;

步骤二,胞外多糖制备工艺优化;

步骤三,优化可利用的碳源;优化后的可利用的碳源包括:等质量添加的甘露糖、果糖、葡萄糖和半乳糖;

采用初始pH为6,以甘露糖、果糖、葡萄糖和半乳糖为复合碳源的优化MRS培养基,34℃下发酵24h制备胞外多糖;胞外多糖的产量由7.70g/L提高到13.31g/L,产量提升72.85%,胞外多糖纯度由88.513μg/mL提升到93.852μg/mL;

所述基因层面的方法为:通过基因组分析,确定了副干酪乳杆菌JY062利用PTS磷酸转移酶系统将甘露糖、海藻糖、半乳糖和果糖转运到细胞内,葡萄糖和乳糖通过渗透作用进入细胞内;

所述表型微生物碳源利用层面的方法为:将活化后的副干酪乳杆菌JY062菌株在平板上进行三区划线,固体培养基培养48h后,用Inoculatorz棉签挑取直径3mm的菌落到接种液IF3中,配成菌悬液;使用棉签少量多次蘸取菌落,将菌悬液轻轻搅拌均匀,保证菌悬液不起气泡,并用浊度仪检测,调节菌悬液的浓度至90-98%T,T为浊度单位;在Biolog GenIII微孔板中,每孔加入100µL的菌悬液,之后将微孔板直接放入OmniLog的孵育、读数仪中,37℃培养48h,分析菌株可利用的碳源。

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