[发明专利]一种番茄青枯病拮抗细菌WJB0802及其应用

说明书

本发明提供一种番茄青枯病拮抗细菌WJB0802及其应用。所述番茄青枯病拮抗细菌WJB0802分类命名为枯草芽孢杆菌，保藏号为GDMCC62697。根据本发明，还提供一种番茄青枯病拮抗细菌WJB0802在制备防治番茄青枯病的生防菌剂中的应用，以及制备促进植物生长制剂中的应用。本发明从不同地域青枯病发病田间的健康番茄根际进行功能细菌的定向筛选，通过根际浸染复筛法最终筛选出这样一种防治效果最好的番茄青枯病拮抗细菌WJB0802，其抑菌圈直径达37.73mm，盆栽试验结果表明WJB0802显著降低了番茄青枯病的病情指数67.9％，本发明为防控番茄青枯病建立模式生物菌株提供了新策略。

技术领域

本发明涉及番茄青枯病防治领域，更具体地涉及一种番茄青枯病拮抗细菌WJB0802及其应用。

背景技术

番茄原产于美洲大陆，大约十六、十七世纪作为观赏性植物传入我国。上世纪50年代我国的种植规模迅速发展，随着多年连作病原菌和番茄中可能带有的毒素在土壤中积累，导致了青枯病等土传病害的严重发生。番茄青枯病(bacterial wilt disease)是由Ralstonia solanacearum引起的番茄细菌性枯萎病，在全球严重威胁着热带和温带番茄作物的生长。近些年，随着设施番茄大棚的种植面积的扩大以及高温高湿的土壤环境，给青枯病发展提供了有利条件。青枯病是世界上最具破坏性的植物细菌性土传病害之一，分布于全球各大洲；其致病菌茄科劳尔氏菌具有多样性高、寄主范围广等特点(可侵染50多科200多种植物)，据不完全统计，青枯病引起的经济损失高达30万/公顷，尤其我国山东、新疆、内蒙古、河北、河南、云南、江苏等地番茄青枯病发生严重，常常造成毁灭性灾害。目前还没有有效措施管理这种土传病害。此外，若大量使用化学杀菌剂会导致农药残留而造成土壤和水污染，从而影响到人类的健康和发展。同时会引起病原菌产生抗性。因此，非化学方法包括培养方法、抗性品种和拮抗细菌剂的生物防治对管理番茄青枯病具有重要的意义。然而，由于抗病品种缺乏稳定性和耐久性，因此并不完全有效。采用生防策略控制该病害，以番茄为模式植物开展青枯菌相关研究。

青枯菌主要从番茄的根际部分侵入，也能从植物的茎部伤口进入导管内，吸收植物内的营养物质从而大量繁殖并产生代谢物质，阻碍植物体内的水分运输，继而使植株发病。番茄青枯菌可随病残植物体在土壤中存活大约1～6年。在田间能通过雨水和灌溉水传播，也能通过人畜、农具、带菌土壤和昆虫等传播。生物防治剂(BCAs)是一种自然生长的土壤微生物，它可以积极地攻击植物病原体，抑制疾病的发生，并帮助控制害虫和杂草的生长。已有研究利用木霉、芽孢杆菌和假单胞菌等防治方法对番茄青枯病进行了控制。

环境友好型生物杀虫剂和有益微生物是化学杀虫剂的替代品。利用芽孢杆菌属对植物病害进行生物防治，其防治机制主要通过其代谢产物及其产生的抗菌活性物质对病菌起到抑制作用，并诱导植物的系统抗性。据报道，对植物有益的芽孢杆菌属还能有效的在根际定植，并显示出促进植物生长和/或疾病抑制活性。研究发现，解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和球形芽孢杆菌重的某些特定菌株可显著降低多种宿主上各种疾病的发病率或严重程度。这些菌株能诱导番茄植株产生的系统抗性(ISR)已在温室或田间试验中得到证明。植物病害的生物防治方法研究已被证明是环保的，对许多植物病原体有效，并被认为是植物病害管理的长期解决方案。

董等从青枯病发病田间的健康番茄根际土壤中分离出了对青枯菌具有显著的抑制作用的黏菌R31，黏菌R31对青枯病的生物防治效果为81.09％；同样，Manigundan等从尼尔吉里斯番茄根际土中分离的链霉菌UT4A49对番茄青枯病具有较好的抑菌能力，在盆栽试验中，通过生物有机肥修正后其对番茄青枯病的生物防治活性为78.5％；而Hardiyanti等从香草根际中分离出13株香草枯萎病有效拮抗菌，其中7菌株均能达到60％以上的抑制率；Abraha等从南非多个果园木瓜和柑橘品种果实表面分离得到了10株对柑橘指状青霉病具有拮抗作用的酵母菌，其中分离株B13对在接种后能显著降低发病率(低于5％)阻止脐橙和柠檬的腐烂，防控效果最佳。