[发明专利]检测试剂在制备2型糖尿病伴动脉粥样硬化诊断工具中的应用

说明书

本发明属于生物医学领域，具体涉及检测试剂在制备2型糖尿病伴动脉粥样硬化诊断工具中的应用。所述检测试剂为检测CD4基因和PLEK基因的表达量，或者检测CD4蛋白和PLEK蛋白的表达量的检测试剂。所述试检测剂选自特异性识别CD4基因和PLEK基因的寡核苷酸探针、特异性扩增CD4基因和PLEK基因的引物或特异性结合样本中CD4蛋白和PLEK蛋白的结合剂。本发明研究证实CD4和PLEK在疾病组中表达显著上调，同时，我们分析了CD4和PLEK诊断能力，ROC曲线结果显示CD4和PLEK的AUC值分别为0.733及0.790，结果表明，CD4和PLEK可作为动脉粥样硬化和2型糖尿病诊断生物标志物和干预靶点。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及检测试剂在制备2型糖尿病伴动脉粥样硬化诊断工具中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种慢性炎症性疾病，由脂质在动脉中积累导致狭窄和血栓形成，能够影响心脏、大脑和外周血管，是世界范围内致死致残的主要原因。研究表明，糖尿病与心血管疾病的关系密切，糖尿病患者，特别是在2型糖尿病患者，其动脉斑块坏死核心面积较大，动脉中膜钙化较多，相较于健康人群，糖尿病患者发生心血管疾病的概率会增加2到4倍。研究发现，低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和炎症因子被认为是糖尿病患者心血管疾病风险的因素之一。此外，胰岛素信号通路在动脉粥样硬化中起作用，平滑肌细胞中的胰岛素受体缺失会导致内膜增生减少。然而，对于动脉粥样硬化和2型糖尿病在基因水平上的联系，至今尚无系统的报道。因此，确定新的诊断标记物和治疗靶点对于动脉粥样硬化和2型糖尿病的早期诊断和特异性干预尤为重要。

RNA-SEQ和微阵列技术是探索与疾病发病机制有关的基因、识别诊断生物标志物或探索疾病治疗靶点的有效工具。有研究者发现，在破裂斑块中，CCL4、CCL18、MMP9和SPP1水平升高，可作为介入靶点。ACLY、SERPING1和57ANPEP已被证实与2型糖尿病的发生相关。然而，对于动脉粥样硬化与2型糖尿病的联合研究目前仍在起步阶段。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种检测试剂在制备2型糖尿病伴动脉粥样硬化诊断工具中的应用，所述检测试剂为检测CD4基因和PLEK基因的表达量，或者检测CD4蛋白和PLEK蛋白的表达量的检测试剂。

更进一步的，所述试检测剂选自特异性识别CD4基因和PLEK基因的寡核苷酸探针、特异性扩增CD4基因和PLEK基因的引物或特异性结合样本中CD4蛋白和PLEK蛋白的结合剂。

更进一步的，特异性扩增CD4基因的引物序列如SEQ ID NO.1-2所示，特异性扩增PLEK基因的引物序列如SEQ ID NO.3-4所示。

基于同一个发明构思，本发明还提供了一种诊断2型糖尿病伴动脉粥样硬化的试剂盒，所述试剂盒含有检测CD4基因和PLEK基因的表达量，或者检测CD4蛋白和PLEK蛋白的表达量的检测试剂；所述试检测剂选自特异性识别CD4基因和PLEK基因的寡核苷酸探针、特异性扩增CD4基因和PLEK基因的引物或特异性结合样本中CD4蛋白和PLEK蛋白的结合剂。

基于同一个发明构思，本发明还提供了所述CD4蛋白和PLEK蛋白的表达抑制剂在制备治疗2型糖尿病伴动脉粥样硬化的药物中的应用。

基于同一个发明构思，本发明还提供了一种治疗2型糖尿病伴动脉粥样硬化的药物，有效成分为所述CD4蛋白和PLEK蛋白的表达抑制剂。

本发明具有如下有益效果：

本发明从GEO数据库中获得了4个数据集，其中包含动脉粥样硬化斑块和2型糖尿病相关的表达谱。在确定了这两种疾病之间共有的差异表达基因后，我们对基因进行了功能丰富分析。然后，基于蛋白质-蛋白质相互作用网络筛选了核心基因，并在其他两个验证数据集和临床样本中进行了验证。本研究表明，CD4和PLEK可作为动脉粥样硬化和2型糖尿病诊断生物标志物和干预靶点。

附图说明