[发明专利]一种CD47抗体的试剂组合物及其应用

说明书

本发明提供了一种CD47抗体的试剂组合物及其应用。本发明提供的CD47抗体的试剂组合物包括：CD47抗体；以及用于配制缓冲液的试剂，所述缓冲液为含有EDTA和FBS的PBS缓冲液。本发明的试剂组合物可用于准确检测CD47抗体与细胞结合性能。

技术领域

本发明是关于一种CD47抗体的试剂组合物及其应用，具体而言，是关于一种能够准确检测CD47抗体与细胞表面的CD47的结合力的试剂组合物、含有该试剂组合物的试剂盒及相关应用。

背景技术

CD47是一种广泛表达在细胞表面的约50KD的跨膜糖蛋白，其结构主要包括胞外N端的一个IgV-like结构域，五个高度疏水的跨膜结构域和一个具有多种剪接形式的胞内肽段。CD47因其功能多与整合素相关，因此又被称为整合素相关蛋白(Integrin AssociatedProtein,IAP)。CD47在细胞自我识别过程中发挥着重要作用。

信号调节蛋白家族SIRPα是CD47重要的配体。CD47-SIRPα是机体内重要的“自我”识别信号。正常情况下当CD47结合SIRPα时发出“别吃我”信号，SIRPα胞内ITIM招募并激活SHP-1，通过SHP-1抑制下游酪氨酸激酶依赖的信号途径，调控巨噬细胞，抑制吞噬作用。但这一保护机制易被肿瘤细胞利用。人们最先在卵巢癌中发现CD47，随后相继在慢性骨髓白血病、急性髓性白血病、膀胱癌等肿瘤细胞中都发现CD47表达。并且肿瘤细胞中CD47的表达量要远比正常细胞高，过表达CD47帮助肿瘤细胞免受巨噬细胞的吞噬从而逃过固有免疫系统的监视。肿瘤细胞通过高表达CD47骗过免疫系统，那么在理论上可以通过阻断CD47-SIRPα信号来促进免疫系统对肿瘤细胞的清除作用。事实上，通过抗CD47或SIRPα抗体来阻断CD47-SIRPα信号已经被证明确实可以促进肿瘤细胞的清除。因此，CD47作为一个潜在的肿瘤免疫治疗靶点受到了广泛的关注。目前，全球已经有多家公司在投入开发CD47抗体。其中进展较快的是Forty seven公司开发的Hu5F9。

然而，CD47在体内广泛表达，肿瘤细胞表面表达CD47抗原，正常红细胞表面也表达CD47，CD47抗体会影响机体内正常CD47的功能，因此CD47抗体在临床上出现的副作用成为了抗体开发的巨大挑战。本领域原有技术运用过程中产生的抗体，起初易出现血凝，随后出现与红细胞结合的副作用，这样就会在临床上浪费了大量的抗体，并且降低了药物的安全性，影响了疗效，像Hu5F9在临床试验中出现了红细胞毒性，另外还有些抗体表现出了T细胞毒性等。

因此，准确检测CD47抗体与不同细胞表面的CD47的结合能力是很有必要的。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种检测CD47抗体结合能力的试剂及相关应用。

本案发明人在研究中发现，在检测CD47抗体与细胞的结合性能时，所用的流式缓冲液(洗液)将可能会对CD47抗体与细胞的结合性能产生一定的影响，从而有可能影响检测结果。通过进一步的分析研究，本发明提供了一种能够准确检测CD47抗体与细胞表面的CD47的结合力的试剂组合物、含有该试剂组合物的试剂盒及相关应用。

具体而言，一方面，本发明提供了一种CD47抗体的试剂组合物，所述组合物包括：

CD47抗体；以及

用于配制缓冲液的试剂，所述缓冲液为含有EDTA和FBS的PBS缓冲液。