[发明专利]一种锑选择性SxArsR蛋白及其构建的锑污染监测全细胞微生物传感器

权利要求书

1.一种锑选择性ArsR家族蛋白，SxArsR，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.权利要求1所述的锑选择性SxArsR蛋白在特异性识别三氧化二锑中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，锑选择性SxArsR蛋白在制备锑污染物监测用全细胞微生物传感器中的应用，所述的锑污染物是三氧化二锑。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，是将锑选择性SxArsR蛋白在底盘细胞中表达，获得全细胞微生物传感器。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，是将锑选择性SxArsR蛋白与荧光素酶融合后在底盘细胞中表达，获得全细胞微生物传感器。

6.根据权利要求3、4或5所述的应用，其特征在于，所述的全细胞是食异源物鞘氨醇菌Sphingobium xenophagum C1和大肠杆菌Escherichia coli DH5α。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，是用引物1106U：5′-GAATTCCCGAACCCTTCAGCTTGCG-3′和引物1106D：5′-ATGTTTTTGGCGTCTTCCATGGCAGCCCTTTTCT-3′，以Sphingobium xenophagum C1的基因组为模板，扩增获得sxarsR基因及其上游序列；用引物LucU1：5′-GTCAGAAAAGGGCTGCCATGGAAGACGCCAAAAACA-3′和引物LucD1：5′-CTCGAGTTACACGGCGATCTTTCC-3′，以pTAL-Luc质粒为模板，扩增萤火虫荧光素酶luc基因完整序列；利用引物1106U：5′-GAATTCCCGAACCCTTCAGCTTGCG-3′和引物LucD1：5′-CTCGAGTTACACGGCGATCTTTCC-3′对扩增的sxarsR和luc两个基因片段进行PCR融合，获得在两端分别含有EcoRI和XhoI酶切位点的融合片段sxars R-luc，通过限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切后连接pET24a载体，重组载体分别转化Sphingobium xenophagum C1和Escherichia coli DH5α，由此获得锑污染物监测用的全细胞微生物传感器。

8.一种全细胞微生物传感器，其特征在于，是将权利要求1所述的锑选择性SxArsR蛋白融合荧光素酶在底盘细胞中表达，获得全细胞微生物传感器。

9.根据权利要求8所述的全细胞微生物传感器，其特征在于，所述的底盘细胞是食异源物鞘氨醇菌Sphingobium xenophagum C1和大肠杆菌Escherichia coli DH5α。

10.权利要求8所述的全细胞微生物传感器在锑污染物监测中的应用。