[发明专利]用于前列腺癌筛查的标记物、试剂盒及其使用方法

说明书

本发明涉及一种用于前列腺癌筛查的标记物、试剂盒及其使用方法，所述标记物为尿液外泌体标记物PCA3、TMPRSS2‑ERG、SPDEF、HAAH和AMACR；所述用于前列腺癌筛查的试剂盒包含五种标记物的反应液和β‑actin反应液；β‑actin反应液中的前引物序列如SEQ ID NO:1所示，后引物序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的试剂盒采用逆转录聚合酶链反应检测PCA3、TMPRSS2‑ERG、SPDEF、HAAH和AMACR五个标记物，5个标记物结合使用，大大提高了诊断的敏感性和特异性。本发明在对50例前列腺癌的尿外泌体的RT‑qPcr PCA3、TMPRSS2‑ERG、SPDEF、HAAH和AMACR的检测显示，ROC特征曲线显示，本发明的试剂盒诊断前列腺癌的灵敏度为91.43%，特异性达到了89.66%；此结果优于市场其他产品。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于前列腺癌筛查的标记物、试剂盒及其使用方法。

背景技术

前列腺癌是目前男性面临的最常见癌症之一，是我国第六大恶性癌。在美国男性发病率第一位，死亡率第二位。前列腺癌在我国排男性恶性肿瘤的第三位。由于前列腺癌在早期没有任何症状，患者往往容易错过最佳的治疗时机，导致诊疗难度加大。常在体检时行直肠指检或检测血清PSA升高被发现。前列腺特异性抗原（prostate specific antigen 或者 PSA）是一种由前列腺上皮细胞分泌产生的一种丝氨酸蛋白酶，是一种糖蛋白。PSA及其衍生物是目前早期筛查前列腺癌最常用的生物标志物，目前已经发展出了PHI和4KScore等结合多指标联合检测结果的综合评判标准。但因PSA特异性低带来的假阳性给患者带来了大量的经济和生理负担，人们仍然在寻找更好的前列腺癌生物标志物以更好的实现前列腺癌的筛查。尚没有一种结果可靠的早筛产品，目前体检用的PSA难以满足早期筛查的要求，急需要一些崭新的技术问世。

非入侵性的前列腺癌的诊断方法一直是临床研究中的热点。尿液为前列腺最直接接触的液体，因此，我们认为尿液里应有大量的肿瘤外泌体。

鉴于此，申请此专利。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于前列腺癌筛查的标记物、试剂盒及其使用方法，解决穿刺活检带来的诸多问题，开发出高效准确的早诊早筛试剂盒，满足临床需求。减轻病人的痛苦，降低前列腺癌的死亡率。

本发明的目的是提供一种用于前列腺癌筛查的试剂盒。

本发明的另一目的是提供上述用于前列腺癌筛查的试剂盒的使用方法。

根据本发明的具体实施方式的用于前列腺癌筛查的尿液外泌体标记物，所述尿液外泌体标记物为PCA3、TMPRSS2-ERG、SPDEF、HAAH和AMACR。

尿液外泌体标记物PCA3、TMPRSS2-ERG、SPDEF、HAAH和AMACR的用途，所述尿液外泌体标记物用于前列腺癌筛查。

根据本发明的具体实施方式的用于前列腺癌筛查的试剂盒，所述试剂盒包含五种标记物的反应液和β-actin反应液；β-actin反应液中的前引物序列如SEQ ID NO:1所示，后引物序列如SEQ ID NO:2所示；通过逆转录聚合酶链反应检测尿外泌体中的PCA3、TMPRSS2-ERG、SPDEF、HAAH和AMACR表达水平。

检测PCA3、TMPRSS2-ERG、SPDEF、HAAH和AMACR的反应液所使用的试剂相同，只是引物不同。