[发明专利]具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球及其制法

权利要求书

1.一种具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球，其特征在于，包括多个载药纳米颗粒与丝素蛋白分子I，丝素蛋白分子I之间相互作用形成微米颗粒，多个载药纳米颗粒分散在微米颗粒内；

丝素蛋白分子I中混有六味地黄复方有效成分提取物；

载药纳米颗粒由六味地黄复方有效成分提取物与丝素蛋白分子II构成，丝素蛋白分子II之间相互作用形成纳米颗粒，六味地黄复方有效成分提取物分散在纳米颗粒内；

具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球的制备方法包括以下步骤：

（1）制备六味地黄复方有效成分提取物；

（2）制备载药纳米颗粒；

将步骤（1）得到的六味地黄复方有效成分提取物和丝素蛋白水溶液混合，加入可与丝素蛋白水溶液混溶的溶剂后依次进行搅拌、冷冻、室温解冻和去除溶剂，得到载药纳米颗粒；

丝素蛋白水溶液的浓度为0.5~10.0wt%，搅拌速率为1~1000rpm，搅拌时间为0.1~15min；

（3）制备六味地黄丝素蛋白微球；

将步骤（2）得到的载药纳米颗粒和丝素蛋白水溶液混合，先向由载药纳米颗粒和丝素蛋白水溶液组成的体系中加入六味地黄复方有效成分提取物，丝素蛋白水溶液中的丝素蛋白与加入的六味地黄复方有效成分提取物的质量比为1~1000:1~1000，再加入聚乙二醇水溶液后混合均匀形成乳液，静置孵育后洗去聚乙二醇，得到具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球；

（4）在10~95℃下将具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球在甲醇蒸汽、水蒸气或乙醇蒸汽中熏蒸0.1~48h，熏蒸结束后自然干燥。

2.根据权利要求1所述的一种具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球，其特征在于，载药纳米颗粒的粒径为10~1000nm，六味地黄丝素蛋白微球的粒径为0.2~100μm，载药纳米颗粒中六味地黄复方有效成分提取物的含量为0.001~80wt%，六味地黄丝素蛋白微球中六味地黄复方有效成分提取物的含量为0.001~80wt%；六味地黄丝素蛋白微球的缓释总时长≥240h，前24h累计释放率≥19.2%，中间48h累计释放率为≤30.8%，最后累计释放率为≤27%。

3.一种具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备六味地黄复方有效成分提取物；

（2）制备载药纳米颗粒；

将步骤（1）得到的六味地黄复方有效成分提取物和丝素蛋白水溶液混合，加入可与丝素蛋白水溶液混溶的溶剂后依次进行搅拌、冷冻、室温解冻和去除溶剂，得到载药纳米颗粒；

丝素蛋白水溶液的浓度为0.5~10.0wt%，搅拌速率为1~1000rpm，搅拌时间为0.1~15min；

（3）制备六味地黄丝素蛋白微球；

将步骤（2）得到的载药纳米颗粒和丝素蛋白水溶液混合，先向由载药纳米颗粒和丝素蛋白水溶液组成的体系中加入六味地黄复方有效成分提取物，丝素蛋白水溶液中的丝素蛋白与加入的六味地黄复方有效成分提取物的质量比为1~1000:1~1000，再加入聚乙二醇水溶液后混合均匀形成乳液，静置孵育后洗去聚乙二醇，得到具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球；

（4）在10~95℃下将具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球在甲醇蒸汽、水蒸气或乙醇蒸汽中熏蒸0.1~48h，熏蒸结束后自然干燥。

4.根据权利要求3所述的一种具有多级梯度缓释功能的六味地黄丝素蛋白微球的制备方法，其特征在于，步骤（1）的过程如下：

（1.1）牡丹皮加蒸馏水浸泡后蒸馏，过滤，得到挥发油和牡丹皮药渣备用；

（1.2）山茱萸加乙醇水溶液回流，过滤，得到山茱萸药渣和滤液备用；

（1.3）将熟地黄、山药、泽泻、茯苓研磨成粉末，然后与步骤（1.1）得到的牡丹皮药渣和步骤（1.2）得到的山茱萸药渣混合，加水浸泡、煎煮后合并、过滤浓缩得到提取液；

（1.4）采用含有大孔吸附树脂的层析柱对步骤（1.2）得到的滤液与步骤（1.3）得到的提取液的混合液进行处理，得到提纯液；

（1.5）将步骤（1.1）得到的挥发油和步骤（1.4）得到的提纯液混合后，冷冻干燥，研磨，得到六味地黄复方有效成分提取物。