[发明专利]同时检测小麦抗赤霉病基因Fhb1与Fhb7的多重PCR标记引物组及其应用

说明书

本申请公开了一组可以同时检测小麦抗赤霉病基因Fhb1与Fhb7的多重PCR标记引物组，该引物组由核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.4所示的引物组成；该引物组首次实现对小麦抗赤霉病基因Fhb1与Fhb7的多重PCR标记的同时检测，通过一次PCR即可这两种抗性基因进行检测，提高分子标记辅助选择效，加快小麦育种进程；此外，该分子标记引物对通过人工比对和校正而获得，扩增效率较高，扩增结果特异性好，进一步提高分子标记辅助选择的准确性。

技术领域

本申请涉及分子标记领域，特别是一种同时检测小麦抗赤霉病基因Fhb1与Fhb7的多重PCR标记引物组及应用。

背景技术

小麦是最重要的粮食作物之一，其生产安全对社会经济稳定具有重要意义。小麦生产易受多种病害影响，由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引起的赤霉病与禾布氏白粉菌(Blumeria graminis f.sp.tritici)引起的白粉病严重影响小麦的产量及品质(Parry D W,Jenkinson P,Mcleod L.Fusarium Ear Blight(Scab)in Small GrainCereals-a Review.Plant Pathology,1995,44:207-238；Zhao Z,Sun H,Song W,Lu M,Huang J,Wu L,Wang X,Li H.Genetic analysis and detection of the geneMlLX99onchromosome 2BL conferring resistance to powdery mildew in the wheat cultivarLiangxing 99.TheoreticalApplied Genetics,2013,126:3081-3089.)。在我国，小麦赤霉病过去主要发生于长江中下游麦区、华南冬麦区和东北春麦区，近年来扩展至黄淮麦区、北方麦区、西南麦区和西北麦区。

Fhb1与Fhb7是目前仅有的2个被成功克隆的抗赤霉病基因(Li G,Zhou J,Jia H,Gao Z,Fan M,Luo Y,Zhao P,Xue S,Li N,Yuan Y,Ma S,Kong Z,Jia L,An X,Jiang G,LiuW,Cao W,Zhang R,Fan J,Xu X,Liu Y,Kong Q,Zheng S,Wang Y,Qin B,Cao S,Ding Y,ShiJ,Yan H,Wang X,Ran C,Ma Z.Mutation of a Histidine-Rich Calcium-Binding-Protein Gene in Wheat Confers Resistance to Fusarium Head Blight.NatureGenetics,2019,51:1106-1112；Su Z,Bernardo A,Tian B,Chen H,Wang S,Ma H,Cai S,Liu D,Zhang D,Li T,Trick H,St.Amand P,Yu J,Zhang Z,Bai G.A Deletion Mutationin Tahrc Confers Fhb1 Resistance to Fusarium Head Blight in Wheat.NatureGenetics,2019,51:1099-1105；WANG H W,SUN S L,GE W Y,ZHAO L F,HOU B Q,WANG K,LYU ZF,CHEN L Y,XU S S,GOU J,LI M,SU P S,LI X F,WANG G P,BO C Y,FANG X J,ZHUANG W W,CHENG X X,WU J W,DONG L H,CHEN W Y,LI W,XIAO G L,ZHAO J X,HAO Y C,XU Y,GAO Y,LIU W J,Liu,Y H,Yin,H Y,Li J Z,Li X,Zhao,Y,Wang X Q,Ni F,Ma X,Li AF,Xu,SS,Bai,GH,Nevo,E,Gao,CX,Ohm,H,Kong,LR.Horizontal gene transfer of Fhb7from fungus underlies Fusarium head blight resistance in wheat.Science,2020,368:eaba5435)。其中，Fhb1位于3B染色体短臂，是目前在小麦抗赤霉病育种中应用最为广泛，也最为成功的抗病位点(Xie GQ,Zhang MC,Chakraborty S,Liu CJ.The effect of3BS locus of Sumai 3 on Fusarium head blight resistance in Australianwheats.Animal Production Science.2007,47:603-607)，其诊断标记已得到广泛应用(朱展望,徐登安,程顺和,高春保,夏先春,郝元峰,何中虎.中国小麦品种抗赤霉病基因Fhb1的鉴定与溯源.作物学报,2018,44:473-482)，对抗赤霉病育种工作具有重要推动作用。Fhb7来源于小麦近缘种长穗偃麦草(Thinopyrum ponticum)7EL染色体，研究人员通过不断回交，成功创制出携带该位点的小麦-长穗偃麦草的小片段代换系，目前已成功应用于小麦育种工作，携带Fhb7的首个小麦品种于2021年获得审定。小麦赤霉病抗性是由多基因调控的数量性状，通过聚合不同抗性基因可促进产生持久稳定抗性，对小麦抗赤霉病育种具有重要意义。