[发明专利]PCR反应体系、反应试剂、试剂盒和方法

权利要求书

1. 一种PCR方法，其特征在于，将植物叶片作为DNA模板直接置于PCR反应体系中进行PCR反应，PCR反应体系包含PCR反应试剂、DNA模板、引物F、引物R和水，所述PCR反应试剂为2×mix时，40ml PCR反应试剂包含：

5×buffer                           16mL；

5M甜菜碱                            16mL；

Deep Vent DNA聚合酶DVS 40ng/μL      2.4mL；

Pfu DNA聚合酶 100ng/mL              160μL；

Taq DNA聚合酶 30ng/mL               160μL及

dNTP 25mM                           640μL；

复制因子A Mja 10ng/μL               1.2mL；

焦磷酸酶 160ng/mL                   100μL；

其中：

 5×buffer包含：115mM Tris-HCl、10mM Mg2+、400mM K+、150mM NH4+、0.5%（v/v）曲拉通X-100、0.001 g/ml BSA；

所述植物为水稻，水稻叶片为新鲜叶片、老叶片或冻存叶片。

2.根据权利要求1所述的PCR方法，其特征在于，所述40ml PCR反应试剂包含2mM NaOH。

3.根据权利要求1所述的PCR方法，其特征在于，所述PCR反应试剂还包含染料，所述染料包括二甲苯青和柠檬黄中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的PCR方法，其特征在于，所述PCR反应的总体积为20μL~50μL。