[发明专利]ATOH1基因检测的特异性引物和探针、试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 202210771795.0 | 申请日: | 2022-06-30 |
公开(公告)号: | CN114959045A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 惠薇;戴文韬;刘佳;丁国徽;王泽群 | 申请(专利权)人: | 苏州睿明医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 苏州三英知识产权代理有限公司 32412 | 代理人: | 朱如松 |
地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | atoh1 基因 检测 特异性 引物 探针 试剂盒 及其 方法 | ||
本发明公开了ATOH1基因检测的特异性引物和探针、试剂盒及其检测方法,其中引物和探针,为依据NCBI的mRNA序列,设计ATOH1基因的引物包括:。本发明通过针对性地优化检测方法,特异性高,敏感性强,方法稳定好数值稳定,进行相对定量,准确度大大提高,结果可靠性强。
技术领域
本发明是关于生物医药技术,特别是关于一种ATOH1基因检测的特异性引物和探针、试剂盒及其检测方法,特别地适用于结直肠组织和肿瘤的ATOH1基因检测的特异性引物和探针技术。
背景技术
ATOH1是内源性调控因子BHLH转录因子家族中的一员。BHLH基因家族包括转录抑制性基因、转录激活性基因,两类基因相互作用,共同调节神经细胞的分化和定位。ATOH1在中枢神经系统和外周神经系统神经细胞的特异分
化中均有作用,且在消化道分泌细胞发育中起终末作用。ATOH1对肿瘤的作用(抑制vs促进),特别是ATOH1在结直肠癌中的表达和预后相关性,目前是领域内的研究热点。
Real-time PCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
现有的研究对准确评估结直肠组织和结直肠癌组织中ATOH1的表达情况,特别是临床采样组织中的ATOH1表达,尚缺乏足够有效的实用方法,缺乏针对ATOH1特异性引物和探针检测方法。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种ATOH1基因检测的特异性引物和探针、试剂盒及其检测方法。
为实现上述目的,本发明的实施例提供了ATOH1基因检测的特异性引物和探针,为依据NCBI的mRNA序列,设计ATOH1基因的引物包括:
序列(5'to3') ATOH1-F AAGCCCCGCGGTTAAAGAT ATOH1-R TCTGAAGCCAAGTCGTTGCTAA ATOH1-P GTAAAAATAATTCTCCCCTACAGAT
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