[发明专利]一种无菌幼鼠专用人工乳及其制备方法

权利要求书

1.一种无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：包括以下原料：驴奶、蛋黄蛋白多肽、小鼠血清、水果浆液、维生素A、维生素D、维生素E、海藻、水。

2.如权利要求1所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：包括以下原料，以100mL计：

3.如权利要求1所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：所述水果浆液的制备方法，包括以下步骤：将水果进行清洗、去皮、去核，然后将经处理的水果加入水中进行榨汁，过筛取滤液，得到水果浆液；

所述水果为桃子、李子、苹果中的一种或两种以上混合物。

4.如权利要求1所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于所述蛋黄蛋白多肽的制备方法，包括以下步骤：

S1、将蛋黄加入混合溶剂中在室温下萃取，用冷冻离心机将固液分离，固体冷冻干燥，溶剂回收；将干燥后的固体磨碎，加入水搅拌均匀，冷冻离心机分离固液，取上清液，冷冻干燥，得到蛋黄蛋白；

S2、将蛋黄蛋白粉碎过筛，得到蛋黄蛋白粉末；将蛋黄蛋白粉末加入水中混合均匀并浸泡，再加入蛋壳膜固定化酶，加热酶解，最后灭酶，冷却至室温后，过滤取上清液，浓缩、冷冻干燥，得到蛋黄蛋白多肽。

5.如权利要求1所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：

步骤S1中所述的混合溶剂由无水乙醇、正己烷按质量比(1-2)：(1-2)混合而成；

步骤S1中所述蛋黄与混合溶剂的浴比为1g：(10-30)mL；

步骤S1中所述干燥后的固体与水的浴比为1g：(10-30)mL；

步骤S2所述蛋黄蛋白粉末、水的浴比为1g：(20-50)mL。

6.如权利要求4所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：所述蛋壳膜固定化酶的用量为蛋黄蛋白粉末重量的2-5％。

7.如权利要求4所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：所述蛋壳膜固定化酶的制备方法，包括以下步骤：

(1)将鸡蛋壳清洗干净后剥去蛋壳，得到蛋壳膜；将蛋壳膜加入盐酸中浸泡，去除残留的钙杂质，最后取出蛋壳膜、清洗、干燥，得到预处理蛋壳膜；

(2)将预处理蛋壳膜加入戊二醛水溶液中，在室温反应，反应后，将预处理蛋壳膜取出，用PBS溶液进行清洗，得到醛基化蛋壳膜，最后将醛基化蛋壳膜置于PBS溶液中储存备用；

(3)将醛基化蛋壳膜加入酶溶液中，加热反应，反应结束后，采用PBS溶液进行清洗，得到酶处理蛋壳膜，最后将酶处理蛋壳膜置于PBS溶液中储存备用；

(4)将步骤(3)得到的酶处理蛋壳膜加入甲苯中混合均匀，然后加入苯甲酚，在室温反应，然后用鼓泡氩气浸泡去除溶解氧，最后在紫外光下照射，然后加入金属制剂溶液，在紫外光下持续照射，反应结束后，分别采用甲苯、水、乙醇进行洗涤，最后低温干燥，得到蛋壳膜固定化酶。

8.如权利要求7所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：所述步骤(1)中蛋壳膜、盐酸的浴比为1g：(10-30)mL；

所述步骤(2)中预处理蛋壳膜、1wt％戊二醛水溶液的浴比为(1-5)g：(100-200)mL；

所述步骤(3)中所述酶溶液为将酶制剂加入0.05mol/L、pH＝7的PBS溶液中混合均匀，得到5-8mg/mL酶溶液；

所述酶制剂为碱性蛋白酶、脂肪酶中的一种或两种以上混合物；

所述步骤(4)中所述金属制剂溶液为将15-20g金属制剂加入300-400mL二甲基亚砜中混合均匀得到金属制剂溶液；

所述步骤(4)中紫外光照射条件为250-380nm、27.9mWcm^-2。

9.如权利要求8所述的无菌幼鼠专用人工乳，其特征在于：所述金属制剂为锌离子、铅离子中的一种或两种以上混合物。

10.如权利要求1-9任一项所述的无菌幼鼠专用人工乳的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将驴奶、蛋黄蛋白多肽、水果浆液、维生素A、维生素D、维生素E辐照处理，小鼠血清、无菌水通过灭菌处理，并按前述原料组成成分的比例进行混匀，完成配制。