[发明专利]稳定性制剂及其制备方法

说明书

本发明的目的在于提供一种包含GLP‑1或GLP‑1类似物的稳定性制剂及其制备方法。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体地，本发明涉及包含蛋白的制剂及其制备方法。

背景技术

糖尿病主要有2种类型，胰岛素依赖型糖尿病(I型糖尿病)和非胰岛素依赖型糖尿病(II型糖尿病)，其中II型糖尿病患者占90％以上。II型糖尿病是以糖代谢紊乱为主要特征的代谢综合征，其发病机制至今尚未完全明确，可能与多种因素有关，其中包括环境、生活方式和遗传因素。目前，II型糖尿病的治疗措施，例如环境加生活方式干预、辅助性药物治疗的效果不显著，胰岛素治疗存在导致肥胖及增加心脑血管疾病风险的弊端，人群发病率和死亡率均居高不下。这些原因促使人们不断寻找新的治疗II型糖尿病的药物，胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂(GLP-1RA)便是其中之一。

衍生自前胰高血糖素原(pro-glucagon)的肽包括胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和胰高血糖素样肽-2(GLP-2)，都源自胰高血糖素原基因。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是一种内源性肠促胰岛素分泌剂，在稳定血糖中起着重要作用，由胰高血糖素原翻译后加工产生，主要以2种生物等效形式存在：GLP-1(7-36)-NH₂和GLP-1(7-37)，在人体内GLP-1(7-36)-NH₂所占比例更高。GLP-1还具有食欲抑制作用，而且对于心血管疾病和减少糖尿病相关的肾病方面也有有利作用。研究发现，GLP-1的主要作用机制如下:①以葡萄糖依赖的方式刺激胰岛素分泌；②降低胰高血糖素分泌；③抑制胃排空；④降低食欲；以及⑤促进胰腺β细胞的生长和复苏。

然而，虽然GLP-1是治疗II型糖尿病的合适候选药物，但是由于人体自身GLP-1的作用持续时间十分短暂(半衰期约2分钟)，很不稳定，在体内很快被二肽基肽酶-4(DPP-4)降解。也就是说，人体自身的GLP-1并不适合开发为药物用于糖尿病的临床治疗。

目前制备长效GLP-1的修饰技术包括：脂肪酸链修饰(比如利拉鲁肽和索马鲁肽)、融合Fc片段技术(比如杜拉鲁肽)和PEG修饰技术(比如洛塞那肽)，但是经修饰的长效GLP-1制剂，尤其是融合Fc片段的长效GLP-1，依然具有片段峰及反相杂质的问题。

CN102772787A涉及制备GLP-1化合物稳定溶液的办法，所述方法包括在碱性pH条件下加热所述GLP-1化合物溶液至40℃以上的温度至少5分钟。所述GLP-1化合物为利拉鲁肽，利拉鲁肽具有31个氨基酸，而且是在较高pH条件下进行加热，并不适合常规的生物制品。此外，该专利申请中加热处理解决的是利拉鲁肽聚集的问题，并未针对片段峰的产生和反相杂质提出解决办法。

通常肽类、蛋白质由于对温度敏感，容易发生物理或化学降解产生片段以及其它杂质，还容易发生聚集，在碱性条件下还容易发生水解。因此，亟需开发用于长效GLP-1的稳定性制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种包含GLP-1或GLP-1类似物的稳定性制剂及其制备方法，所述稳定性制剂显示显著降低片段峰及杂质，所述稳定性制剂的制备包括将所述包含GLP-1的制剂在弱酸性条件下加热到55℃-65℃温度的步骤。

第一方面，本发明提供了一种稳定性制剂，所述稳定性制剂包含GLP-1或GLP-1类似物，并且所述稳定性制剂经过在55℃-65℃的温度下进行处理的步骤。

在一些实施方案中，所述稳定性制剂的pH为6.5-7.0，经过在55℃-65℃的温度下进行处理的步骤。

优选地，所述稳定性制剂的pH为6.5-7.0，经过在55℃-65℃的温度下处理30-90分钟的步骤。

优选地，所述稳定性制剂的pH为6.5-7.0，经过在55℃-65℃的温度下处理50-70分钟的步骤。