[发明专利]活化T细胞与阻断性抗体联合制备抗肿瘤药物的用途及抗肿瘤药物

权利要求书

1.活化T细胞与阻断性抗体联合制备抗肿瘤药物的用途，所述活化T细胞，是从患者自身组织或体液中分离细胞，先进行抗人CD3抗体分选得到CD3⁺T细胞，再经抗人CD3抗体、抗人CD28抗体和人IL-2刺激活化获得；所述阻断性抗体是抗人癌细胞产生的唾液酸化IgG的抗体、抗人Siglec-7抗体、抗人Siglec-9抗体、抗人Siglec-10抗体及抗人PD-1抗体中的任意一种或几种；所述药物同时含有活化T细胞与阻断性抗体；

所述组织为癌组织，所述体液为胸水或腹水。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述体液为胸水或腹水时，活化T细胞的制备方法如下：

患者胸水或腹水经离心得细胞沉淀，细胞沉淀经PBS清洗后，用密度梯度离心法分离获得初级体液细胞，初级体液细胞用人淋巴细胞分离液进行离心分离获得体液细胞；

体液细胞用抗人CD3抗体避光孵育，然后用PBS洗涤一次并重悬于含1%（v/v）FBS的PBS中，用流式分选仪分选出CD3⁺T细胞；

CD3⁺T细胞培养体系中加入抗人CD3抗体、抗人CD28抗体和人IL-2刺激诱导培养，获得活化T细胞。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述分选得到的CD3⁺T细胞，是CD3⁺7AAD^-的T细胞。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗人癌细胞产生的唾液酸化IgG的抗体为RP215或抗SIA-IgG人源化抗体，所述抗SIA-IgG人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

5.一种抗肿瘤药物，其特征在于，包括活化T细胞和阻断性抗体，所述活化T细胞，是从患者自身组织或体液中分离细胞，先进行抗人CD3抗体分选得到CD3⁺T细胞，再经抗人CD3抗体、抗人CD28抗体和人IL-2刺激活化获得；所述阻断性抗体是抗人癌细胞产生的唾液酸化IgG的抗体、抗Siglec-7抗体、抗Siglec-9抗体、抗Siglec-10抗体及抗PD-1抗体中的任意一种或几种；

所述组织为癌组织，所述体液为胸水或腹水。

6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述体液为胸水或腹水时，活化T细胞的制备方法如下：

患者胸水或腹水经离心得细胞沉淀，细胞沉淀经PBS清洗后，用密度梯度离心法分离获得初级体液细胞，初级体液细胞用人淋巴细胞分离液进行离心分离获得体液细胞；

体液细胞用抗人CD3抗体避光孵育，然后用PBS洗涤一次并重悬于含1%（v/v）FBS的PBS中，用流式分选仪分选出CD3⁺T细胞；

CD3⁺T细胞中加入抗人CD3抗体、抗CD28抗体和人IL-2刺激诱导培养，获得活化T细胞。

7.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述抗人癌细胞产生的唾液酸化IgG的抗体为RP215或抗SIA-IgG人源化抗体，所述抗SIA-IgG人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。