[发明专利]茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法

说明书

本发明公开了一种茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法，其是将粉碎后的茯砖茶粉末，加入85℃以上生理盐水中，浸泡10min～30min，再拍打1min～2min后，倾注于改良孟加拉红培养基上，培养3天～4天，计数。本发明的茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法，可以充分地使冠突散囊菌闭囊壳破裂、更好地使冠突散囊菌释放，能够真实反映茯砖茶中冠突散囊菌的数量，大大提高检测结果的准确度和稳定性，能够更加准确地评价茯砖茶的质量好坏。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法。

背景技术

一直以来，茯砖茶是作为边疆少数民族日常生活中不可或缺的必备品，在边疆享有“宁可三日无粮，不可一日无茶”的美誉，且研究发现，尽管边疆人民常年食用牛羊肉及多种高脂高蛋白的食物，但其肥胖病、高血脂、高血糖等“富贵病”的发病率并不高，针对此现象经多方研究发现与茯砖茶内部或表面的金黄色颗粒有关，其是一种对人体非常有益的益生菌体，专家命名为“冠突散囊菌”，它产生的一种酶具有较强的降血脂、调节肠道菌群、提高免疫力、减肥等功效，这一研究发现，使得人们对茯砖茶有了极大关注和重视。更因此，茯砖茶成为人们养生的一种特别推荐方式，以及利用冠突散囊菌开发保健食品具有重要意义。

茯砖茶因具有独特的冠突散囊菌而闻名，而冠突散囊菌数量的多少是衡量茯砖茶质量好坏的重要依据。目前针对冠突散囊菌的计数方法参照GB4789.15-2016第一法《食品安全国家标准.食品微生物学检验霉菌和酵母计数》。然而，该方法从内容上针对的是食品中霉菌和酵母菌的计数，在检测过程中未明确规定冠突散囊菌在孟加拉红培养基上的菌落形态，故有可能计数与冠突散囊菌形态相似的霉菌，不但无法真实反映冠突散囊菌的数量，而且误把毒霉菌当冠突散囊菌可能引起重大安全事故；此外，《食品安全国家标准.食品微生物学检验霉菌和酵母计数》方法中，样品采用的是普通前处理方式(五点法取样，稀释液温度一般在室温进行，未规定浸泡时间)，一是很难使冠突散囊菌闭囊壳破裂，因此在马铃薯葡萄糖培养基上或孟加拉红培养基上形成的菌落可能是2～3个或更多个孢子生长发育而成；二是冠突散囊菌很难释放；三是一些生长较快的霉菌(如图1所示)会抑制冠突散囊菌，因此采用国标方法并不能准确地反映茯砖茶中冠突散囊菌的数量。

近年来，科研工作者对茯砖茶中冠突散囊菌的检测过程进行了一些改进，发现在样品处理过程中，粉碎取样可打破冠突散囊菌闭囊壳结构，显著提高检出率。更进一步发现，冠突散囊菌检测的关键步骤处理为：无菌条件下万能粉碎机全部粉碎后取样，取样量不小于10g，用生理盐水进行稀释后，使用拍击式均质机拍打1min，涂布式进行正置培养。然而，该改进的前处理方式，冠突散囊菌还是无法完全释放，且仍然有可能会计数一些和冠突散囊菌相似的霉菌或因霉菌的大量繁殖抑制了冠突散囊菌，还是不能精准反映茯砖茶中冠突散囊菌的数量。

因此，探求冠突散囊菌更精准的计数方法非常有意义。

发明内容

基于此，本发明的目的之一在于提供一种茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法，该计数方法可以更精准地反映茯砖茶中冠突散囊菌的数量，从而可以更加准确地评价茯砖茶的质量好坏。

实现上述发明目的的具体技术方案包括如下：

一种茯砖茶中冠突散囊菌的计数方法，所述计数方法包括以下步骤：

(1)、将粉碎后的茯砖茶粉末，加至85℃以上的生理盐水中，浸泡10min～30min，得到待测溶液；

(2)、拍打步骤(1)所述待测溶液1min～2min后，将待测溶液倾注于改良孟加拉红培养基上，26℃～30℃培养3天～4天，计数；所述改良孟加拉红培养基包括硫酸铵、蔗糖和KCl。

在其中一些实施例中，步骤(1)中，所述生理盐水的温度为90℃～100℃。

在其中一些实施例中，所述生理盐水的温度为95℃～100℃。