[发明专利]瑞戈非尼药敏标记物及其相关试剂的应用

说明书

本发明公开了一种瑞戈非尼药敏标记物及其相关试剂应用。所述瑞戈非尼药敏标记物为瑞戈非尼耐药标记物或者瑞戈非尼敏感标记物，所述瑞戈非尼耐药标记物为RPL39、KIF9、GPC2、NKPD1、PNMAL1、ATP1A3、OSR2、ADCYAP1R1、WDR86一组标记物中任一种或几种，所述瑞戈非尼敏感标记物为TMPRSS6、ENTPD8、CCDC159中任意一种或几种。上述瑞戈非尼药敏标记物可用于预测瑞戈非尼的药效。通过对肝癌患者组织转录组测序，或通过PCR、基因芯片、组织芯片、NanoString技术、免疫组化的方法检测相关分子的表达，可为瑞戈非尼的用药与肝癌的精准治疗提供线索。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及肿瘤领域，具体为一种瑞戈非尼药敏标记物及其相关试剂应用。

背景技术

原发性肝癌在我国目前常见恶性肿瘤中，发病率排第四位，死亡率排第二位，严重威胁我国人民生命和健康。肝癌早期患者(巴塞罗纳0期A期)，手术切除和肝移植等治疗可以有效地提高肝癌患者的治愈率和生存预后。然而由于肝癌起病隐匿，早期症状缺乏特异性，很多患者被诊断为肝癌时，就已经处于中期或晚期。长期以来，由于药物治疗方案少，而且临床有效率低，中晚期肝癌普遍显示预后差、生存率低。

瑞戈非尼是一种口服的多靶点激酶抑制剂，可抑制VEGFR-1，2，3、TIE-2、BRAF、KIT、RET、PDGFR和FGFR，其结构与索拉非尼相似。瑞戈非尼获得FDA批准用于治疗接受过索拉非尼治疗的肝细胞癌患者。研究表明，索拉非尼-瑞戈非尼序贯治疗可以有限延长患者总体生存时间。瑞戈非尼作为肝癌治疗的二线药物，尽管一定程度可以提升肝癌的治疗效果，但其临床有效率有限，仅为11％，而且大部分人群并不适用，出现了很多无效治疗现象。因此，亟需补充瑞戈非尼的药敏分子分型方案，提高肝癌治疗疗效。

发明内容

为了克服现有技术的问题，本发明的第一个目的在于提供一种瑞戈非尼药敏标记物，采用其可对瑞戈非尼耐药及敏感人群进行提示，为肝癌精准治疗提供依据。本发明的第二个目的提出瑞戈非尼药敏标记物在非治疗目的的瑞戈非尼用药研究中的应用。本发明的第三个目的是提供该瑞戈非尼药敏标记物相关试剂的一些应用，该标记物的相关试剂包括：检测其表达的定量试剂、抑制剂、促进剂等，这些相关试剂的应用能够填补肝癌精准诊疗领域的空白。

本发明的目的是这样实现的：

本发明的第一方面：发现一组基因耐药标记物为RPL39、KIF9、GPC2、NKPD1、PNMAL1、ATP1A3、OSR2、ADCYAP1R1、WDR86的高表达与瑞戈非尼耐药相关。发现基因TMPRSS6、ENTPD8、CCDC159对瑞戈非尼作用敏感。因此这些基因表达能够作为指导原发性肝癌治疗的潜在药敏生物标记物。即本发明提供了一种瑞戈非尼药敏标记物，为瑞戈非尼耐药标记物或者瑞戈非尼敏感标记物；所述瑞戈非尼耐药标记物为RPL39、KIF9、GPC2、NKPD1、PNMAL1、ATP1A3、OSR2、ADCYAP1R1、WDR86的一组标记物中任意一种或几种；所述瑞戈非尼敏感标记物为TMPRSS6、ENTPD8、CCDC159中任意一种或几种。所述瑞戈非尼药敏标记物为RNA或其逆转录的cDNA，或蛋白。

具体筛选过程为：

本发明收集了多例原发性肝癌患者的手术标本，多点取样，通过三维培养的方法，成功建立涵盖数百个位点的肝癌类器官生物库。团队通过苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin，HE)染色，证实类器官保留了患者的病理学特征。通过对类器官和对应的患者标本的免疫荧光、免疫组化染色，发现肝癌类器官与临床上肝癌患者的分子标记物也是一致的。