[发明专利]一种海南霉素的发酵培养基以及发酵方法在审
| 申请号: | 202210601945.3 | 申请日: | 2022-05-30 |
| 公开(公告)号: | CN114854805A | 公开(公告)日: | 2022-08-05 |
| 发明(设计)人: | 张翠芬;梁景乐;何鲁波;苏薇;朱明贺;刘正光;高鹏 | 申请(专利权)人: | 山东胜利生物工程有限公司 |
| 主分类号: | C12P17/18 | 分类号: | C12P17/18;C12N1/20;C12R1/465 |
| 代理公司: | 北京弘权知识产权代理有限公司 11363 | 代理人: | 逯长明;许伟群 |
| 地址: | 272000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 海南 霉素 发酵 培养基 以及 方法 | ||
1.一种海南霉素的发酵培养基,其特征在于,包括以下原料:玉米淀粉,黄豆饼粉,葡萄糖,酵母粉,鱼蛋白胨,硫酸镁,蛋氨酸,氯化钠,淀粉酶,碳酸钙,饮用水。
2.根据权利要求1所述的海南霉素的发酵培养基,其特征在于,包括以下重量份的原料:玉米淀粉7.0-10.0%,黄豆饼粉1.5-2.5%,葡萄糖为1.0-2.0%,酵母粉为0.7%,鱼蛋白胨为0.05%,硫酸镁为0.07%,蛋氨酸为0.02-1.0%,氯化钠为0.2-0.4%,淀粉酶为玉米淀粉份量的0.1%,碳酸钙为0.6-0.8%,饮用水,pH为7.5-7.7。
3.根据权利要求1或2所述的海南霉素的发酵培养基,其特征在于,所述淀粉酶为玉米粉的0.1%。
4.一种海南霉素发酵方法,其特征在于,包括,
步骤S10:取稠李东方链霉菌FCD21001-1甘油管接种到摇瓶培养基中,摇床振荡培养,得到摇瓶种子液;
步骤S20:将S10制备的摇瓶种子液接入一级罐和二级罐分别进行培养,得到二级罐种子液;
步骤S30:将S20得到的二级罐种子液按10%接种量转入发酵罐中,在28±1℃、0.05MPa罐压条件下,通过搅拌转速以及空气流量控制发酵进程,发酵过程中补加淀粉液,其中,发酵罐内的发酵培养基采用上述权利要求1-3中任一项所述的发酵培养基。
5.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法,其特征在于,步骤S10中,接种到摇瓶培养基中的种子液的接种量为0.04%,将接种后的种子液放置偏心距5cm的摇床上,在转速200rpm、温度28±1℃条件下培养44-48h,得到摇瓶种子液。
6.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法,其特征在于,步骤S20中,获得的摇瓶种子液按0.04%接种量接种到一级种子罐中,28±1℃,1:1气比培养34-40h得到一级种子液,其中,一级种子液转种标准菌浓达到30%以上,pH达到7.50以上;
一级种子液按照8-10%接种量接入二级罐,28±1℃,1:0.8气比培养20h得到二级种子液,其中,二级种子液转种标准菌浓达到20%以上,pH达到8.00以上。
7.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法,其特征在于,步骤S30中,发酵罐培养温度为27-29℃,搅拌转速为50-100r/min,通气量为0.5-1.2vvm,发酵培养周期为280-300h。
8.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法,其特征在于,步骤S30中,通过搅拌转速以及空气流量控制培养进程,具体包括:
搅拌转速和空气流量按照溶氧控制,发酵开始时调整溶氧为100%,待溶氧下降到40%时,通过提高空气流量控制溶氧不低于30%,最高气比1:1,若空气流量到最大时溶氧仍降低,则提高搅拌转速,最高不超过100r/min,若60h后溶氧停止降低并发生升高,则按最低转速和气比控制,其中,最低气比1:0.4,最低转速60r/min。
9.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法,其特征在于,发酵过程中补加淀粉液,具体包括,当总糖达到4.5%时,补加30%-45%的淀粉液,控制发酵过程中总糖在4.0%左右,其中,补加淀粉液采用的物料包括玉米淀粉、淀粉酶以及泡敌。
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