[发明专利]一组鉴定重庆大茶树群体种质SNP标记、引物组及其应用在审
申请号: | 202210593468.0 | 申请日: | 2022-05-27 |
公开(公告)号: | CN114891917A | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
发明(设计)人: | 吴致君;罗理勇;曾亮 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 廖曦 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 鉴定 重庆 茶树 群体 种质 snp 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一组鉴定重庆大茶树群体种质SNP标记,其特征在于,所述群体种质SNP标记包括:茶树Chr8染色体第119192825位位点为序列表中SEQ ID No.1的第301位核苷酸,和/或茶树Chr15染色体第40853615位位点为序列表中SEQ ID No.2的第301位核苷酸。
2.用于扩增权利要求1所述的鉴定重庆大茶树群体种质SNP标记的引物组,其特征在于:所述茶树Chr8染色体第119192825位位点通过引物组1核苷酸序列如SEQ ID No.3~5所示扩增鉴定。
3.用于扩增权利要求1所述的鉴定重庆大茶树群体种质SNP标记的引物组,其特征在于:所述茶树Chr15染色体第40853615位位点通过引物组2核苷酸序列如SEQ ID No.6~8所示扩增鉴定。
4.权利要求1所述的SNP标记在鉴定茶树种质是否来源于重庆大茶树群体种质中的应用。
5.根据权利要求4所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取茶树材料的DNA;
2)以提取的DNA为模版,利用权利要求2所述的引物组进行PCR扩增反应;
3)获取荧光信号进行基因分型,当茶树Chr8染色体第119192825位位点荧光信号基因分型为CC时是重庆大茶树群体种质来源,TT时为其他来源茶树种质。
6.根据权利要求4所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取茶树材料的DNA;
2)以提取的DNA为模版,利用权利要求3所述的引物组进行PCR扩增反应;
3)获取荧光信号进行基因分型,当茶树材料Chr15染色体第40853615位位点荧光信号基因分型为TT时是重庆大茶树群体种质来源,CC时为其他来源茶树种质。
7.根据权利要求4所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取茶树材料的DNA;
2)以提取的DNA为模版,利用权利要求2和权利要求3所述的引物组进行PCR扩增反应;
3)获取荧光信号进行基因分型,当茶树Chr8染色体第119192825位位点荧光信号基因分型为CC时是重庆大茶树群体种质来源,TT时为其他来源茶树种质;并且当茶树材料Chr15染色体第40853615位位点荧光信号基因分型为TT时是重庆大茶树群体种质来源,CC时为其他来源茶树种质。
8.根据权利要求5、6、7所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,所述步骤2)中PCR的总反应体积为10μL,包括2.5μL DNA、5μL GUDE FLu-Arms 2x PCRMix、0.5μL混合引物和2μL水。
9.根据权利要求5、6、7所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,所述步骤2)PCR扩增反应条件如下:95℃10min;95℃20s,61-55℃1min 10个循环;95℃20s,55℃1min,28-45个循环;25℃30s。
10.根据权利要求5、6、7所述SNP标记在鉴定重庆大茶树群体种质中的应用,其特征在于,所述步骤2)PCR扩增反应在CFX ConnectTM Real-Time System仪器上进行。
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