[发明专利]一种具有免疫原性的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白在审
| 申请号: | 202210542581.6 | 申请日: | 2022-05-19 |
| 公开(公告)号: | CN114853910A | 公开(公告)日: | 2022-08-05 |
| 发明(设计)人: | 江锦秀;胡奇林;林裕胜;张靖鹏 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K14/30;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/569;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 林文弘;蔡学俊 |
| 地址: | 350013 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 具有 免疫原性 绵羊 肺炎 支原体 hsp70 p113 融合 蛋白 | ||
1.一种具有免疫原性的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白,其特征在于:所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白的氨基酸序列为SQE ID NO.2所示的序列。
2.一种编码权利要求1所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白的融合基因,其特征在于:所述的融合基因的核苷酸序列为SQE ID NO.1所示的序列。
3.一种大肠杆菌表达质粒载体,其特征在于:所述的质粒载体是由权利要求2所述的融合基因插入至质粒pET-30a的Nde I和BamH I位点之间来构建的。
4.根据权利要求3所述的大肠杆菌表达质粒载体,其特征在于:所述的大肠杆菌是BL21(DE3)。
5.一种用于生产权利要求1所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白的大肠杆菌菌株,其特征在于:所述的大肠杆菌菌株含有权利要求3所述的质粒载体。
6.根据权利要求5所述的大肠杆菌菌株,其特征在于:所述的大肠杆菌为BL21(DE3)。
7.一种制备权利要求1所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白的方法,其特征在于:包括以下步骤:
将权利要求2所述的融合基因插入大肠杆菌质粒pET-30a的Nde I和BamH I位点之间,将该质粒转化大肠杆菌获得含有HSP70-P113- pET-30a(+)的菌株,接种培养,IPTG诱导表达;
表达菌体经离心裂解后,收获包涵体,用PBS缓冲液重悬,离心,取上清进行Ni-NTA亲和层析,获取绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述的大肠杆菌是BL21(DE3)。
9.一种检测绵羊肺炎支原体抗体的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白。
10.权利要求1所述的绵羊肺炎支原体HSP70-P113融合蛋白在制备绵羊肺炎支原体亚单位疫苗方面的应用。
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