[发明专利]一种三特异性抗体的设计、制备及用途

权利要求书

1.三特异性抗体，其特征在于，所述抗体包含(a)anti-Her2单克隆抗体Herceptin，(b)anti-CD16a单链抗体scFv，(c)SIRPa D1蛋白，(d)柔性连接子。

2.根据权利要求1所述的三特异性抗体，其特征在于，以Herceptin为三特异性抗体的基本结构，在Herceptin重链N端或C端通过柔性连接子连接anti-CD16a单链抗体scFv或SIRPa D1蛋白，在Herceptin轻链N端或C端通过柔性连接子连接SIRPa D1蛋白或anti-CD16a单链抗体scFv。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的三特异性抗体，其特征在于，所述柔性连接子的氨基酸序列为GGGGSGGGGSGGGGS或GSASAPTLKLEEGEFSEARV。

4.根据权利要求1-2中任一项所述的三特异性抗体，其特征在于，所述Herceptin抗体的重链可变区的氨基酸序列为：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS；轻链可变区的氨基酸序列为：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK。

5.根据权利要求1-2中任一项所述的三特异性抗体，其特征在于，所述anti-CD16a单链抗体scFv由重链可变区VH和轻链可变区VL组成，VH和VL通过柔性肽接头连接在一起。

6.根据权利要求5中任一项所述的三特异性抗体，其特征在于，所述anti-CD16a单链抗体scFv的重链可变区氨基酸序列为：

QVTLRESGPALVKPTQTLTLTCTFSGFSLSTSGVGVGWIRQPPGKALEWLAHIWWDDDKRYSPSLKSRLTISKDTSKNQVVLTMTNMDPVDTATYYCARINPAYFAYWGQGTLVTVSS或为：

EVQLVQSGAEVKKPGESLKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPSGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGSAYYYDFADYWGQGTLVTVSS；

轻链可变区氨基酸序列为：

DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKASQSVDFDGDSFMNWYQQKPGQPPKLLIYTTSNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSNEDPYTFGQGTKLEIK

或为：

QPVLTQPSSVSVAPGQTATISCGGHNIGSKNVHWYQQRPGQSPVLVIYQDNKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYYCQVWDNYSVLFGGGTKLTVL

7.根据权利要求1-2所述的三特异性抗体，其特征在于，所述SIRPa D1蛋白的氨基酸序列为：

EEELQVIQPDKSVLVAAGETATLRCTATSLIPVGPIQWFRGAGPGRELIYNQKEGHFPRVTTVSDLTKRNNMDFSIRIGAITPADAGTYYCVKFRKGSPDDVEFKSGAGTELSVRAK

或为：

EEELQVIQPDKSVLVAAGETATLRCTATSLIPVGPIQWFRGAGPGRELIYNQKEGHFPRVTTVSDLTKRNNMDFSIRIGNITPADAGTYYCVKFRKGSPDDVEFKSGAGTELSVRAK