[发明专利]一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，所述制备方法按下述步骤依次进行：(1)将虾壳类原料烘干、粉碎，制得虾壳粉；(2)配制复合酶液；(3)将复合酶液、虾壳粉以及去离子水混合，酶解，制得水解多肽液；(4)将三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解制得钼酸钠溶液；(5)将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，螯合反应，结束后用乙醇沉淀，过滤，洗涤，干燥即得；且所述复合酶液包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酶激活剂。及采用上述方法制备的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物。本发明通过采用三种不同酶的复配配合酶激活剂的添加，显著提高了虾壳中多肽的提取率，及螯合率，实现了北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的高效制备。

技术领域

本发明涉及材料领域，特别涉及一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物及其制备方法。

背景技术：

目前，从虾壳中提取多肽的方法有碱液提取法、碱溶酸沉提取法、盐溶液提取法、超声波辅助酶提取法、微生物发酵法等。

碱液提取法是利用氢氧化钠溶液进行提取，或加以超声波辅助。方法操作简单，成本低廉，但对环境污染较大，提取时蛋白质水解程度难以控制，提取的蛋白质结构也会受到不同程度破坏。

碱溶酸沉提取法是蛋白质在碱性溶液中溶解，再用酸液调节pH至蛋白质等电点，使蛋白质沉淀析出。此为目前实验室内最常用的蛋白质提取方法，需要再进行水解才能成为多肽，工艺方法成熟，但会产生大量的酸碱溶液，具有一定危险性，对环境造成一定影响。

盐溶液提取法也叫盐析法，通过加入饱和盐溶液中和蛋白质分子表面电荷达到沉淀。此法简单，无危害试剂，但提纯率低，需要对提取的蛋白质进行脱盐纯化，并且需要对蛋白质进行水解才能得到多肽。

超声波辅助酶提取法：利用超声波的空话效应、热效应、化学效应、生物效应等对细胞壁和细胞膜进行物理破碎，增大物质分子的运动频率和速度，最终提高蛋白质提取率，加以酶解可以得到多肽。此方法也会增加一定的成本消耗。

微生物发酵法：利用微生物自身的代谢作用，改变蛋白质本身的品质，产生易消化的短肽、氨基酸等物质，使废弃物变成高附加值的发酵产品。该方法回收率最高，但是微生物发酵条件严苛，不易控制。

因鉴于此，特提出此发明。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种虾壳多肽提取率高、钼螯合率高的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法及由该制备方法制得的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物。

为了实现上述目的，本发明提供了一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，所述制备方法按下述步骤依次进行：

(1)将虾壳类原料烘干、粉碎，制得虾壳粉；

(2)配制复合酶液；

(3)将复合酶液、虾壳粉以及去离子水混合，酶解，制得水解多肽液；

(4)将三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解、反应，制得钼酸钠溶液；

(5)将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，螯合反应，结束后用乙醇沉淀，过滤，洗涤，干燥即得；

且所述复合酶液包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酶激活剂。

本发明通过3种三种酶的复配辅以酶激活剂，显著提高了虾壳多肽的提取率。

优选地或可选地所述酶激活剂为氯化钠；优选的，所述氯化钠以氯化钠溶液，优选0.1mol/L的氯化钠溶液的形式添加；优选的，所述氯化钠溶液的添加量为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶总质量的0.1-0.2％。

优选地或可选地，所述复合酶液中木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2-80:20-25:10.5-12；

优选的，木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2:22.4:10.5。