[发明专利]一种曲唑酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用在审
申请号: | 202210436730.0 | 申请日: | 2022-04-25 |
公开(公告)号: | CN114773338A | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 邵越水;王镇;阮天宇 | 申请(专利权)人: | 杭州同舟生物技术有限公司 |
主分类号: | C07D471/04 | 分类号: | C07D471/04;C07K14/765;C07K16/06;C07K16/44 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 黎双华 |
地址: | 310018 浙江省杭州市江干区经*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 曲唑酮 人工 半抗原 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种曲唑酮人工半抗原,其特征在于,
其分子结构式如(Ⅰ)所示:
(Ⅰ)。
2.如权利要求1所述曲唑酮人工半抗原的制备方法,其特征在于,
包括以下步骤:
(1)将吡啶三唑酮与氢化钠反应,反应结束后与一氯三碘丙烷继续反应,得到产物A;
(2)将产物A与1-(3-甲氧基苯基)哌嗪盐酸盐反应,得到黄色油状物B;
(3)将黄色油状物B加酸水解,得到白色轻质固体C;
(4)将白色轻质固体C与氢化钠、溴乙酸乙酯反应,得到黄色油状物D;
(5)将黄色油状物D与碱液发生水解反应,反应结束后,调节溶液pH至酸性,经萃取纯化后得到白色固体Ⅰ,即权利要求1所述的曲唑酮人工半抗原。
3.根据权利要求2所述曲唑酮人工半抗原的制备方法,其特征在于,
所述步骤(1)中:
氢化钠的物质的量与吡啶三唑酮相同,与氢化钠反应温度为70~85℃,反应时间0.5~2h;
一氯三碘丙烷的物质的量为吡啶三唑酮的1~2倍,与一氯三碘丙烷反应为95~105℃,反应时间15~24h。
4.根据权利要求2所述曲唑酮人工半抗原的制备方法,其特征在于,
所述步骤(2)中:
产物A与1-(3-甲氧基苯基)哌嗪盐酸盐的摩尔比为1:(1~2),反应温度105~115℃,回流反应3~8小时。
5.根据权利要求2所述曲唑酮人工半抗原的制备方法,其特征在于,
所述步骤(4)中:
氢化钠的物质的量与白色轻质固体C相同;
溴乙酸乙酯的物质的量为白色轻质固体C的1~3倍;
反应温度为55~70℃,回流反应0.5~2h。
6.一种曲唑酮人工抗原,其特征在于,
其分子结构式如(Ⅱ)所示:
;
(Ⅱ)
其中,BSA为牛血清蛋白。
7.如权利要求6所述曲唑酮人工抗原的制备方法,其特征在于,
所述曲唑酮人工抗原通过活泼酯法使权利要求1所述的曲唑酮人工半抗原与牛血清蛋白结合,获得曲唑酮人工抗原。
8.根据权利要求7所述的人工抗原的制备方法,其特征在于,
包括以下步骤:
(a)将权利要求1所述曲唑酮人工半抗原Ⅰ、N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺按摩尔比1∶1.35~1.5∶1.35~1.5混合于N,N-二甲基甲酰胺中,20~30℃下搅拌反应18~20小时,反应结束后离心取上清液;
(b)将上述上清液滴加到牛血清蛋白溶液中,混合液置于1~5℃下静置过夜,经透析、离心取上清液,获得曲唑酮人工抗原。
9.如权利要求6所述曲唑酮人工抗原在制备抗曲唑酮抗体中的应用。
10.一种抗曲唑酮抗体,其特征在于,
其由所述权利要求6所述曲唑酮人工抗原经动物免疫得到的、可与曲唑酮发生特异性免疫反应的球蛋白。
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