[发明专利]一种利用生物膜干涉技术快速检测金黄色葡萄球菌的方法在审
申请号: | 202210411888.2 | 申请日: | 2022-04-19 |
公开(公告)号: | CN114791491A | 公开(公告)日: | 2022-07-26 |
发明(设计)人: | 张晓光;李爽;宋慧妍;于婉婷;张艳;路琪;刘子婕;郝莹;白玛措姆 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 长春市恒誉专利代理事务所(普通合伙) 22212 | 代理人: | 李荣武 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 生物膜 干涉 技术 快速 检测 金黄色 葡萄球菌 方法 | ||
1.一种利用生物膜干涉技术快速检测金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于:包括传感器平衡、传感器活化、抗体固定化、一次封闭、二次封闭、样品检测及结果分析,其具体步骤如下:
步骤一、传感器平衡:将第二代氨基偶联传感器末端浸入纯水中预湿至少10分钟,以平衡传感器;
步骤二、传感器活化:将平衡后的第二代氨基偶联传感器浸入20mM 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和10mM N-羟基琥珀酰亚胺混合试剂中活化300-450秒;
步骤三、抗体固定化:将活化后的第二代氨基偶联传感器浸入用pH 5-7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液稀释的浓度为12.5-100μg/mL的抗体溶液中固定化400-900秒;
步骤四、乙醇胺盐酸盐溶液一次封闭:将固定抗体后的第二代氨基偶联传感器浸入乙醇胺盐酸盐溶液(pH 8.5,1mol/L)中封闭300-450秒;
步骤五、牛血清白蛋白溶液二次封闭:将乙醇胺盐酸盐封闭后的第二代氨基偶联传感器浸入1%牛血清白蛋白溶液中封闭300-450秒;
步骤六、样品检测及结果分析:在牛血清白蛋白溶液中封闭后,将第二代氨基偶联传感器浸入含0.02%吐温-20的PBS磷酸盐缓冲溶液中平衡150-450秒,然后将其浸入样品中进行金黄色葡萄球菌的检测,实时读取结合信号,根据结合信号分析检测结果。
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