[发明专利]冠状病毒M蛋白胞外域多肽及其应用

权利要求书

1.冠状病毒M蛋白胞外域多肽，其特征在于，所述冠状病毒M抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示；或由SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸序列组成；或具有与所述冠状病毒M抗原多肽相同或者相似功能的多肽或者蛋白质分子经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列组成。

2.根据权利要求1所述冠状病毒M抗原多肽，其特征在于，所述多肽序列通过已有的体外多肽合成设备和不同技术原理人工合成；包括多肽的合成、纯化以及最后产品的收集。

3.一种用于检测临床血清样品中SARS-CoV-2M蛋白抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒以权利要求1所述的冠状病毒M抗原多肽中的一种或者多种为检测抗原。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒基于酶联免疫吸附法的抗原检测试剂盒，包含预包被所述多肽中的一种或者多种的固相载体，所述固相载体为酶标板。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含以下试剂：酶标抗体、10×洗涤液、阳性对照、阴性对照、显色底物和终止液。

6.多肽偶联物，其特征在于，包含以下：如权利要求1所述的冠状病毒M抗原多肽和载体蛋白；

所述冠状病毒M抗原多肽和所述载体蛋白通过交联剂进行偶联；

所述交联剂选自以下的一种或者组合：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(简称EDC)、碳化二亚胺、戊二醛、二异氰酸；

所述载体蛋白选自以下的一种或者组合：卵清蛋白(OVA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、热休克蛋白、白喉毒素突变体CRM197、白喉类毒素、破伤风杆菌类毒素、霍乱弧菌分泌的不耐热肠毒素各亚基、流感嗜血杆菌蛋白D。

7.疫苗免疫原组合物，其特征在于，包含：如权利要求1所述的冠状病毒M抗原多肽、或如权利要求2所述的多肽偶联物；和/或包含能增强偶联抗原免疫原性的佐剂；

所述佐剂选自以下的一种或者组合：氢氧化铝、脂质A、灭活的细菌、多糖、矿物油、弗氏不完全佐剂、弗氏完全佐剂、磷酸铝、铁盐、锌盐、钙盐、乙酰化酪氨酸、乙酰化糖、阳离子衍生化的多糖、阴离子衍生化的多糖、聚磷腈、生物降解微球、单磷酰脂质A。

8.一种接种免疫原的方法，其特征在于，包括如下步骤：通过肌肉注射、皮肤接种、皮下多点注射、舌下接种、口服接种、鼻腔接种、或者腹腔注射方式向人和其他潜在的敏感动物施用有效量的权利要求7所述疫苗免疫原组合物。

9.一种能诱导产生特异性体液免疫应答的SARS-CoV-2M抗原胞外域多肽，其特征在于，属于如下(a)或(b)其中之一：

(a)具有如权利要求1中SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

(b)将(a)中的氨基酸序列通过一个或几个氨基酸的取代、缺失或添加而形成的、具有与(a)中多肽相同或相似功能的多肽或蛋白质分子。

10.如权利要求9所述的SARS-CoV-2M抗原胞外域多肽在制备SARS-CoV、SARS-CoV-2和MERS-CoV疫苗中的应用。

11.一种能诱导产生特异性体液免疫应答的MERS-CoV M抗原胞外域多肽，其特征在于，属于如下(c)或(d)其中之一：

(c)具有如权利要求1中SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；

(d)将(c)中的氨基酸序列通过一个或几个氨基酸的取代、缺失或添加而形成的、具有与(c)中多肽相同或相似功能的多肽或蛋白质分子。