[发明专利]检测真菌的引物组、探针组、试剂盒、用途及检测方法

说明书

本发明实施例提供一种检测真菌的引物组、探针组、试剂盒、用途及检测方法，它包括：用于检测包括曲霉属真菌、青霉属真菌和/或镰刀菌属真菌的引物对：序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物1和SEQ ID NO.2所示的反向引物1；用于检测包括念珠属真菌、隐球菌属真菌、新生隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌和/或地霉属真菌的引物对：序列如SEQ IDNO.4所示的正向引物2A；序列如SEQ ID NO.5所示的正向引物2B和序列如SEQ ID NO.6所示的反向引物2。可同时检测包含念珠属真菌、青霉属真菌、曲霉属真菌、镰刀菌属真菌、新型隐球菌属真菌、隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌、耶氏肺孢子菌等真菌，涵盖范围较现有技术更广。

技术领域

本发明涉及一种检测真菌的引物组、探针组、试剂盒、用途及检测方法。

背景技术

真菌感染(fungal infection)是指对人类有致病性的真菌感染情况。根据侵犯人体部位的不同，临床上将致病真菌分为浅部真菌和深部真菌。真菌深部感染可侵犯人体皮肤、黏膜、深部组织和内脏，甚至引起全身播散性感染。

近年来，随着高效广谱抗生素、免疫抑制剂和抗恶性肿瘤药物的广泛应用，器官移植、导管技术以及外科其他介入性治疗的深入开展，特别是AIDS的出现，条件致病性真菌引起的系统性真菌病日益增多，新的致病菌不断出现，对免疫力低下的患者尤其是ICU患者的病情带来严重负担。

真菌感染的临床表现主要包括念珠菌病、曲霉病、隐球菌病、接合菌病和马内菲青霉病等。根据国内近期的研究表明，重症监护病房患者的真菌感染发病率为8％-15％，器官移植患者的真菌感染发病率为20％-40％，血液系统肿瘤患者的真菌感染发病率为31％。

真菌感染的实验室检查是包括直接镜检法和培养法、病理学方法、血清学方法和分子生物学方法等检查方法。

直接镜检法和培养法：直接镜检法和培养检查法是形态学检查的基本方法，直接镜检是真菌学检查最经典的方法,具有快速、简便的特点。但阳性率较低，漏诊率高达45％，且阴性结果不能排除诊断，与培养检查结合才能确诊。培养检查法可进一步提高病原体检出的阳性率，同时确定致病菌的种类，缺点是培养时间长。

组织病理学检查：组织病理学检查对于确定致病菌在组织内寄生并了解宿主的反应十分重要，而且一旦在组织切片中发现真菌菌丝和/或孢子，即为诊断的有力证据。传统的真菌诊断弊端是检测敏感性低，无法早期检测出感染。

分子生物学检测：分子生物学方法具备操作简单、特异性强、灵敏度高和时间短的优点，可成为临床上真菌病原体快速检测的方法之一。目前该方法学已成为热点，是真菌感染早期检测的趋势。