[发明专利]检测真菌的引物组、探针组、试剂盒、用途及检测方法

权利要求书

1.一种检测真菌的引物组，其特征在于，它包括：

用于检测包括曲霉属真菌、青霉属真菌和/或镰刀菌属真菌的引物对：序列如SEQ IDNO.1所示的正向引物1和SEQ ID NO.2所示的反向引物1；

用于检测包括念珠属真菌、新生隐球菌属真菌、隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌和/或地霉属真菌的引物对：序列如SEQ ID NO.4所示的正向引物2A；序列如SEQ ID NO.5所示的正向引物2B和序列如SEQ ID NO.6所示的反向引物2。

2.如权利要求1所述检测真菌的引物组，其特征在于，它还包括：

用于检测耶氏肺孢子菌的引物对：序列如SEQ ID NO.8所示的正向引物3和SEQ IDNO.9所示的反向引物3。

3.一种与权利要求1所述引物组配合使用的探针组，其特征在于，它包括：

用于检测包括曲霉属真菌、青霉属真菌和/或镰刀菌属真菌的引物探针：序列如SEQ IDNO.3所示的探针1；

用于检测包括念珠属真菌、隐球菌属真菌、新生隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌和/或地霉属真菌的引物探针：序列如SEQ ID NO.7所示的探针2。

4.一种与权利要求2所述引物组配合使用的探针组，其特征在于，它包括：

用于检测包括曲霉属真菌、青霉属真菌和/或镰刀菌属真菌的引物探针：序列如SEQ IDNO.3所示的探针1；

用于检测包括念珠属真菌、隐球菌属真菌、新生隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌和/或地霉属真菌的引物探针：序列如SEQ ID NO.7所示的探针2；

用于检测耶氏肺孢子菌的引物探针：序列如SEQ ID NO.10所示的探针3。

5.一种检测真菌的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述引物组和权利要求3或4所述探针组。

6.如权利要求5所述检测真菌的试剂盒，其特征在于，它还包括：用于内参基因检测的引物对和引物探针。

7.如权利要求6所述检测真菌的试剂盒，其特征在于，所述内参基因为ACTIN基因；用于内参基因检测的引物对为：序列如SEQ ID NO.11所示的ACTIN基因正向引物和序列如SEQID NO.12所示的ACTIN基因反向引物；用于内参基因检测的引物探针为：序列如SEQ IDNO.13所示的探针。

8.如权利要求3-4任意一项所述探针组或如权利要求5-6任意一项所述试剂盒，其特征在于，所述引物探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；

所述荧光报告基团包括：5-FAM、6-FAM、HEX、TET、VIC、JOE、Cy3、Cy3.5、NED、TAMRA、ROX、Texas Red、Cy5、Cy5.5或Quasar670；所述荧光淬灭基团包括：TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3或MGB。

9.权利要求1-2任意一项所述引物组和/或权利要求3-4任意一项所述探针组在检测真菌的试剂盒中的用途。

10.一种真菌检测方法，其特征在于，包括：

提取样本基因组DNA作为扩增模板，其中，所述样本为痰液；

使用权利要求8所述试剂盒，在实时荧光定量PCR仪上对得到的DNA模板进行扩增，同时实时荧光信号采集和分析；

根据荧光信号采集和分析结果判断样本真菌感染情况，实现对真菌的分型/不分型检测。