[发明专利]一株产聚谷氨酸的蓝色解淀粉芽孢杆菌在审
申请号: | 202210340897.7 | 申请日: | 2022-04-02 |
公开(公告)号: | CN114958646A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 刘静雯;刘浩;孙成武 | 申请(专利权)人: | 安徽粤智徽源生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/02;C12R1/07 |
代理公司: | 合肥辉达知识产权代理事务所(普通合伙) 34165 | 代理人: | 汪守勇 |
地址: | 233010 安徽省蚌埠市中国(安徽)自由贸易试验区蚌*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株产聚 谷氨酸 蓝色 淀粉 芽孢 杆菌 | ||
1.一株产聚谷氨酸的蓝色解淀粉芽孢杆菌,菌株形态为蓝色菌落,分类学命名为解淀粉芽孢杆菌,拉丁名为Bacillus amyloliquefaciens,自主编号为YZHY21.A02,已保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏号为GDMCC NO:61924,保藏日期为2021年9月9日,保藏单位地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,广东省科学院微生物研究所,邮政编码510070。
2.如权利要求1所述的蓝色解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,该菌株采用如下方法分离:取2g广东阳江地区豆豉放入装有50mL无菌水的并带有玻璃珠的300mL三角瓶中,震荡1h,并在80℃水浴20min;取上述菌悬液0.1mL于10mL灭菌离心管中,进行梯度稀释并涂布到营养琼脂培养基上,35℃倒置恒温培养,待长出单菌落后挑取蓝绿色菌落再次稀释涂布,恒温培养,之后将单一菌落接种到营养琼脂斜面35℃恒温培养,培养完成后放4℃冰箱保存。
3.如权利要求2所述的蓝色解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,所采用的琼脂培养基组成为:蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,氯化钠10g/L,琼脂18g/L,pH值7.4。
4.如权利要求1所述蓝色解淀粉芽孢杆菌在发酵生产聚谷氨酸中的应用,其特征在于,发酵培养基采用谷氨酸发酵培养基或者黄豆发酵培养基。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,采用谷氨酸发酵培养基发酵生产聚谷氨酸的步骤如下:取斜面菌种接种于液体种子培养基,35℃,150r/min培养12~24h,再接种至摇瓶发酵培养基,35~40℃,150r/min摇瓶发酵48~72h;取发酵液加水稀释2~3倍,8000r/min离心20~25min去除菌体及其它不溶物,取上清液加入2~3倍95%乙醇沉淀12~24h,再离心收集沉淀物,然后加去离子水将沉淀物溶解,冷冻干燥,可得到聚谷氨酸粗品。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,液体种子培养基组成为:葡萄糖10g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,氯化钠10g/L,pH值7.4;发酵培养基组成为:葡萄糖40g/L,谷氨酸钠50g/L,酵母粉3g/L,氯化铵2g/L,磷酸氢二钾3g/L,硫酸镁0.3g/L,氯化钙0.4g/L,pH值7.2~7.5。
7.如权利要求4所述的应用,其特征在于,采用黄豆发酵培养基发酵生产聚谷氨酸的步骤如下:将黄豆洗净并在水中浸泡12~18h,取50g放在300mL三角瓶中121℃灭菌25min;在斜面试管中倒入适量无菌水,将菌落刮至无菌水中,然后倒入装有黄豆的三角瓶中晃匀,放置在35~40℃培养箱中培养48~72h;加入黄豆量的6~10倍去离子水冲洗黄豆,8000r/min离心20~25min去除菌体及其它不溶物,取上清液加入2~3倍95%乙醇沉淀12~24h,再离心收集沉淀物,然后加去离子水将沉淀物溶解,冷冻干燥,可得到聚谷氨酸粗品。
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