[发明专利]一种冠状病毒RBDdm变异体及其应用

权利要求书

1.一种制备预防冠状病毒及其变异体的疫苗的方法，包括：

(1)提供至少一种基于冠状病毒刺突糖蛋白的免疫原性片段或者包括所述免疫原性片段的免疫原性组合物；其中，所述免疫原性片段为包括冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质；其中：

①所述冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质的氨基酸序列选自:

(a1)SEQ ID NO：1；

(a2)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸后产生的氨基酸序列；以及

(a3)(a1)或(a2)的截短体；或者

②所述冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质的氨基酸序列选自：

(b1)SEQ ID NO：3；

(b2)由SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸后产生的氨基酸序列；以及

(b3)(b1)或(b2)的截短体；以及

(2)将(1)中所述免疫原性片段或所述免疫原性组合物与药学上可接受的佐剂混合；

其中，所述冠状病毒为SARS-CoV-2病毒，其变异体包括但不限于Beta变异体、Delta变异体、Omicron变异体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质的氨基酸序列由编码基因编码，其中：

①所述编码基因选自：

(c1)SEQ ID NO：2；

(c2)与SEQ ID NO：2所示核酸序列80％以上同源、所编码的蛋白质与冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体蛋白质80％以上同源的核酸序列；以及

(c3)(c1)或(c2)的截短体；或者

②所述编码基因选自：

(d1)SEQ ID NO：4；

(d2)与SEQ ID NO：4所示核酸序列80％以上同源、所编码的蛋白质与冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体蛋白质80％以上同源的核酸序列；以及

(d3)(d1)或(d2)的截短体。

3.一种分离的核酸分子，其编码冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质；以及

①其序列选自：

(c1)SEQ ID NO：2；

(c2)与SEQ ID NO：2所示核酸序列80％以上同源、且所编码的蛋白质与冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体蛋白质80％以上同源的核酸序列；以及

(c3)(c1)或(c2)的截短体；或者

②其序列选自选自：

(d1)SEQ ID NO：4；

(d2)与SEQ ID NO：4所示核酸序列80％以上同源、且所编码的蛋白质与冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体蛋白质80％以上同源的核酸序列；以及

(d3)(d1)或(d2)的截短体。

4.根据权利要求3所述核酸分子，其中，所述冠状病毒为SARS-CoV-2病毒。

5.一种重组载体，包括：

如权利要求3所述的核酸分子；以及

表达载体。

6.一种融合细胞，包括：

如权利要求5所述的重组载体；以及

表达细胞。

7.一种如权利要求3所述的核酸分子编码的冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质的制备方法，包括：

获得核酸分子；

将核酸分子转化入表达细胞；

在表达细胞内表达冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质；以及

纯化所述冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质。

8.根据权利要求7所述的制备方法，进一步包括：

构建包含核酸分子的重组载体；以及

将所述重组载体转化入表达细胞内。

9.一种疫苗组合物，包括：

至少一种免疫原性片段或者包括所述免疫原性片段的免疫原性组合物；其中，所述免疫原性片段为由权利要求3所述的核酸分子编码的冠状病毒刺突糖蛋白RBD变异体的蛋白质；以及

佐剂。