[发明专利]一种靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针，其特征在于结构式如下：

。

2.一种制备按照权利要求1所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针，其特征在于步骤如下：

1）将5-10mg Cyclopeptide 66溶于HEPES-EDTA溶液中，向其加入3-10当量的三异丙基乙酰胺（2-羧乙基）磷化氢（溶于0.2 mol/L醋酸铵缓冲液中，PH=6-7），排空溶液内气体，重复三次；室温反应60分钟，然后转移至离心过滤器中，4000 转/分钟离心90分钟；1-2 mL、0.2 mol/L醋酸铵缓冲液冲洗溶液，还原后的多肽加入1-2 mL 、0.2 mol/L醋酸铵缓冲液中，pH=6-7，转移至第二个反应容器；4-6 mg NOTA-马来酰亚胺和0.1-1mL、 0.2 mol/L的醋酸钠缓冲液（PH=6-8）混合后加入第二个反应容器中，40-60℃反应3小时；反应完成后，反应混合物移至离心过滤器中，4000 转/分钟离心90分钟；弃流后，加入2 mL超纯水，4000 转/分钟再次离心90分钟，再次弃流；用1mL超纯水收集纯化好的NOTA-PA2881，冻干，经过质谱分析确认后得到产物；所述双功能螯合剂包括但不限于NOTA、DOTA或NODAGA；

2)将步骤1)得到的产物采用放射性核素标记；

所述放射性核素包括但不限于¹⁸F、⁶⁸Ga、⁶⁴Cu或⁸⁹Zr；

所述放射性核素标记的方法为：300μL乙腈中依次加入5μL的2mM AlCl₃的0.1M乙酸钠水溶液和2μL 10 mM DMSO或去离子水溶解的步骤1)的产物，最终加入1.85～3.70GBq(50～100mCi)的Na¹⁸F溶液400μL，高温密闭反应约10-20min，冷却后，即生成所述的放射性核素标记的环肽配合物。

3.按照权利要求2所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针制备方法，其特征在于所述放射性核素为¹⁸F。

4.按照权利要求2所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针制备方法，其特征在于所述双功能螯合剂为NOTA。

5.按照权利要求2所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针制备方法，其特征在于所述放射性核素标记的方法为：将Cyclopeptide 66与NOTA连接后的产物溶于DMSO或乙腈中10 mM，2-4 μL；加入AlCl₃的乙酸钠水溶液，2 mM，10-20 μL；加入200-400μL乙腈；加入经QMA纯化后的Na¹⁸F溶液，200-400 μL；密闭加热至100℃，反应10-20min，冷却后，将反应液通过预先活化的C18-light固相萃取柱，再用去离子水冲洗C18-light固相萃取柱，去除未反应的游离¹⁸F离子，再经75％乙醇溶液将产品从C18-light固相萃取小柱洗脱，即得结构式所示的¹⁸F标记的多肽产品，将乙醇浓度稀释至10％以下制成示踪剂注射液。

6.按照权利要求1所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针制备方法，其特征在于示踪剂¹⁸F-AlF-NOTA-PA2881作为PD-L1分子靶向示踪剂在PET分子成像中的应用。

7.按照权利要求6所述的靶向PD-L1的多肽PET分子成像探针制备方法，其特征在于示踪剂¹⁸F-AlF-NOTA-PA2881作为检测实体瘤患者(非小细胞肺癌、胃癌、结直肠癌)中肿瘤的PD-L1表达情况的示踪剂的应用，该示踪剂可特异性结合肿瘤细胞膜上的PD-L1蛋白，并可通过各种正电子核素检测设备定性、定量地分析。