[发明专利]一种胃癌细胞的培养基及其培养方法在审
| 申请号： | 202210231340.X | 申请日： | 2022-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN114634910A | 公开（公告）日： | 2022-06-17 |
| 发明（设计）人： | 柴杰;刘立青;温晓文;李荣 | 申请（专利权）人： | 山东第一医科大学附属肿瘤医院（山东省肿瘤防治研究院;山东省肿瘤医院） |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12N5/071 |
| 代理公司： | 临沂恒致远专利代理事务所(普通合伙) 37362 | 代理人： | 李平 |
| 地址： | 250117 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胃癌 细胞 培养基 及其 培养 方法 | ||
1.一种用于胃癌细胞的培养基，其特征在于，所述培养基含有Advanced DME/F12、B 2750×、Glutamax 2mM/ml、丙氨酰-谷氨酰胺、吡哆醛、异戊二烯焦磷酸盐、EGF、bFGF80ng/ml、Wnt-3A、Noggin、维生素E琥珀酸酯、青链霉素混合液2、Primocin、N-乙酰-L-半胱氨酸、胃泌素、甲羟戊酸。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基中还含有3％的人AB血清。
3.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基以磷酸盐缓冲溶液调节pH值至8.0-8.5。
4.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基中甲羟戊酸与丙氨酰-谷氨酰胺的用量为60-100ng/m和0.5-1mg/ml。
5.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基中各成份的用量为基础培养基为Advanced DME/F12，添加物为：B 27 50×、Glutamax 2mM/ml、丙氨酰-谷氨酰胺1mg/ml、吡哆醛30ng/ml、异戊二烯焦磷酸盐60ng/ml、EGF 80ng/ml、bFGF80ng/ml、Wnt-3A
100ng/ml、Noggin 100ng/ml、维生素E琥珀酸酯100ng/ml、青链霉素混合液2×100ng/ml、Primocin 5mg/ml、N-乙酰-L-半胱氨酸1μM/ml、胃泌素10nM/ml、甲羟戊酸80ng/ml，人AB血清3w/v。
6.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基在胃癌细胞的培养中的用途。
7.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述胃癌细胞为SGC-7901、HGC27和MGC803中的任意一种。
8.一种胃癌细胞的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)取SGC-7901细胞，用PBS漂洗2次后，用Accutase消化液消化单层细胞，消化时间为1-8min。
2)消化反应结束后，1000rpm离心5min，去上清，接种于培养瓶培养，培养条件为37℃，5％CO2下培养3-5天，获得人胃癌细胞原代细胞。
3)重复步骤2)获得人胃癌细胞传代培养的细胞。
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