[发明专利]用于编码分泌型Mersacidin的基因表达盒及其制备方法

权利要求书

1.用于编码分泌型Mersacidin的基因表达盒，其特征在于，所述基因表达盒采用克隆扩增技术得到三个克隆片段：基因mrsK2R2FGE、基因mrsAR1D和基因mrsMT；所述基因mrsK2R2FGE为片段1，由mrsK2蛋白编码的基因mrsK2、mrsR2蛋白编码的基因mrsR2、mrsF蛋白编码的基因mrsF、mrsG蛋白编码的基因mrsG和mrsE蛋白编码的基因mrsE组成；所述基因mrsAR1D为片段2，由前肽mrsA编码的基因mrsA、mrsR1蛋白编码的基因mrsR1和mrsD蛋白编码的基因mrsD组成；所述基因mrsMT为片段3，由mrsM蛋白编码的基因mrsM和mrsT蛋白编码的基因mrsT组成。

2.根据权利要求1所述的基因表达盒，其特征在于，所述的三个克隆片段分别选用引物G1和引物G2克隆片段1，选用引物G3和引物G4克隆片段2，选用引物G5和引物G6克隆片段3；所述引物G1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述引物G2的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述引物G3的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述引物G4的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示，所述引物G5的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述引物G6的核苷酸序列如SEQID NO.7所示。

3.根据权利要求1所述的基因表达盒，其特征在于，所述基因表达盒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.重组表达载体，其特征在于，包含权利要求1～3任一项所述的基因表达盒。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为质粒载体或病毒载体。

6.基因工程菌，其特征在于，包含权利要求1～3任一项所述的基因表达盒或权利要求4～5所述的重组表达载体。

7.根据权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述的基因工程菌为Bacillussubtilis SCK168。

8.根据权利要求7所述的基因工程菌，其基本特征在于，所述Bacillus subtilisSCK168的培养基组分包括：豆粕粉10±5g/L，酵母粉10±5g/L，蛋白胨10±5g/L，葡萄糖10±5g/L，氯化钠5±2g/L。

9.分泌型Mersacidin的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

1)构建权利要求4所述的重组表达载体；

2)将权利要求4所述的重组表达载体转入权利要求6所述的基因工程菌中；

3)筛选阳性重组子在培养基中发酵培养。

10.用权利要求9所述的制备方法获得的分泌型Mersacidin。