[发明专利]一种高产赤藓糖醇的菌株及其发酵产赤藓糖醇的方法有效

专利信息
申请号: 202210169163.7 申请日: 2022-02-23
公开(公告)号: CN114525213B 公开(公告)日: 2023-03-17
发明(设计)人: 李由然;石贵阳 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/16 分类号: C12N1/16;C12N1/36;C12N1/02;C12P7/18;C12R1/645
代理公司: 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 代理人: 冯智文
地址: 214000 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 高产 赤藓糖 菌株 及其 发酵 方法
【权利要求书】:

1.一种高产赤藓糖醇的菌株用于合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

(1)菌种活化,将解脂亚罗酵母(Yarrowia lipolytica)菌种CGMCC No.24118接种到YPD培养基,活化后制得活化的种子;

(2)种子培养,将步骤(1)活化后的种子接种到含有种子培养基的摇瓶中,培养后制得种子液;

(3)分批发酵,将步骤(2)制得的种子液接种在含有发酵培养基的发酵罐中,进行分批发酵;接种量为10-15%;

(4)细胞回用发酵,步骤(3)发酵结束后,分离发酵液中的细胞和可溶性产物,补加培养基成分,形成培养液,继续发酵;培养液中成分为:葡萄糖300-450g/L,氮源添加量10-50g/L,磷酸氢二钾添加量0.1-5g/L,磷酸二氢钾添加量0.1-5g/L,七水合硫酸镁0.5-2g/L,氯化铜10-30mg/L;

(5)发酵结束后,发酵液中提纯赤藓糖醇;

高产赤藓糖醇的菌株,其分类命名为解脂亚罗酵母(Yarrowia lipolytica),已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.24118。

2.根据权利要求1所述的合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(1)中,YPD培养基的成分包括葡萄糖、蛋白胨和酵母粉,自然pH。

3.根据权利要求1所述的合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)中,种子培养基的制备方法为:将酵母粉、柠檬酸铵、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁于水中,调节pH6.4,高压灭菌后加入灭菌后的葡萄糖溶液。

4.根据权利要求1所述的合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(2)中,种子培养基的成分为:12g/L酵母粉,6g/L柠檬酸铵,1.2g/L磷酸二氢钾,0.6g/L七水合硫酸镁,200g/L葡萄糖;pH为6.0。

5.根据权利要求1所述的合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(3)中,发酵培养基的制备方法为:将葡萄糖、酵母粉、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、氯化铜与适量消泡剂混合,加热溶解,调节pH至4.0,即得。

6.根据权利要求1所述的合成赤藓糖醇的方法,其特征在于,步骤(3)中,

发酵培养基的成分为:320g/L葡萄糖,10g/L酵母粉,0.224g/L磷酸二氢钾,

0.448g/L七水合硫酸镁,0.0045g/L氯化铜;pH为6.0。

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