[发明专利]一种提高葡萄糖酸杆菌中2-KLG产量的两阶段发酵方法有效
| 申请号： | 202210167872.1 | 申请日： | 2022-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN114480237B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 周景文;秦志杰;李江华;陈坚;曾伟主;余世琴;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/53;C12P7/60;C12R1/01 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 葡萄糖 杆菌 klg 产量 阶段 发酵 方法 | ||
1.一株产2-KLG的重组葡萄糖酸杆菌，其特征在于，以蜡状葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter cerinus)CGMCC 1.110为出发菌株，过表达了山梨酮脱氢酶-山梨糖脱氢酶基因簇和山梨糖脱氢酶；所述山梨酮脱氢酶-山梨糖脱氢酶基因簇和编码所述山梨糖脱氢酶的基因来源于蜡状葡萄糖酸杆菌CGMCC 1.110。
2.根据权利要求1所述的重组葡萄糖酸杆菌，其特征在于，所述山梨酮脱氢酶-山梨糖脱氢酶基因簇以启动子P114调控表达。
3.根据权利要求1所述的重组葡萄糖酸杆菌，其特征在于，所述山梨糖脱氢酶以启动子P112调控表达。
4.一种提高葡萄糖酸杆菌2-KLG产量的方法，其特征在于，采用两阶段发酵策略；所述两阶段发酵策略为：发酵过程0-48h维持pH 5.8～6.2、28～32℃，第49-168h维持pH 6.8～7.2、33～35℃。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖酸杆菌是以葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter cerinus)CGMCC 1.110为出发菌株，过表达了山梨酮脱氢酶-山梨糖脱氢酶基因簇和山梨糖脱氢酶。
6.一种利用氧化葡萄糖酸杆菌生产2-KLG的方法，其特征在于，将权利要求1～3任一所述的重组葡萄糖酸杆菌在含山梨糖的培养基中发酵，发酵过程控制转速为300～500rpm，通气量0.95～1.05vvm，0-48h维持pH 5.8～6.2、温度28～32℃，第49-168h维持pH 6.8～7.2、温度33～35℃。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述培养基按终浓度计，含有：酵母粉8～12g/L，山梨醇145～155g/L。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，0-48h维持pH 6、30℃，第49-168h维持pH 7、33℃。
9.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，0-48h维持pH 6、30℃，第49-168h维持pH 7、35℃。
10.权利要求1～3任一所述的重组葡萄糖酸杆菌，或权利要求4～9任一所述的方法在生产2-KLG或生产含2-KLG的食品、药品或保健品，或2-KLG的上、下游产品中的应用。
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