[发明专利]脂蛋白胆固醇检测方法和试剂盒

说明书

本发明公开了一种适用于自动分析仪的分级测定脂蛋白胆固醇的试剂盒及检测方法以及用于此类测定的试剂，所述方法和试剂能够在无需预处理试样下进行，具有良好特异性的、快速且方便的分析，同时还保证测定试剂能在不影响临床检测结果的情况下，满足试剂线性标准，准确度高并且稳定性好的特点。

技术领域

本发明涉及用于测定脂蛋白中胆固醇的方法和试剂，尤其涉及动脉硬化的诊断相关的脂蛋白胆固醇检测的方法和试剂。

背景技术

胆固醇是细胞的一种重要组分，也是临床上重要的组分，因为过高水平的胆固醇导致在内皮下间隙中的巨噬细胞摄取胆固醇后使巨噬细胞转化为泡沫细胞(foam cell)并继而导致动脉硬化的原发病灶的发展。低密度脂蛋白(LDL)在血液的胆固醇运输中起主要作用并且是动脉硬化的危险因素。已知小而密LDL，其在LDL中粒度特别小并且与标准LDL相比密度更高，具有多于正常LDL数倍水平的致动脉粥样化的能力。小而密LDL的增加是动脉硬化的主要危险因素之一。因此在临床上进行此类小而密LDL的分级测定(fractionalmeasurement)是非常重要的。

用于测定小而密LDL的常规方法的实例包括超速离心法、电泳法以及使用高效液相色谱的方法。由于这些方法需要昂贵的设备和大量测量时间，因此并不方便。

一种利用自动分析仪测量小而密LDL的方法的实例是以下方法(参见日本专利公布第2003-28882A号)，该方法涉及利用离子强度差异将小颗粒LDL悬浮或溶解，然后利用吸光度差异对小颗粒LDL进行测定。然而，吸光度差异依照上述方法是基于浊度测定的。因此不能测定小而密LDL中胆固醇，因而特异性和准确度不足。

此外，已知一种方法(参见国际专利公布WO2004/053500)，该方法涉及通过使用包含聚阴离子和二价阳离子的分离剂与适合于自动分析仪的试剂的组合来测量小而密LDL中的胆固醇或三酰甘油。该方法能够比超速离心法或电泳法更方便地测量小而密LDL中的脂质组分。但是该方法需要预处理试样并需要将LDL分离成小而密LDL和除这种LDL之外的LDL的步骤。

现有技术中公开了一种方法(参见国际专利公布WO2007026829A1)，该方法涉及通过特定表面活性剂清除除小而密LDL之外的脂蛋白中的胆固醇，然后测定剩余的脂蛋白中的胆固醇的量。该方法能够在无需预处理试样下进行具有快速且方便的分析。然而，经实验发现，该方法测定试剂低端偏差较大，线性较差，室间质评偏差大，无法达到准确检测的要求。

发明内容

本发明涉及一种适用于自动分析仪的分级测定脂蛋白胆固醇的方法以及用于此类测定的试剂，所述方法和试剂能够在无需预处理试样下进行，同时保证测定试剂能在不影响临床检测结果的情况下，满足试剂线性要求，准确度高并且稳定性好。

本发明通过如下技术方案来实现：

本发明提供了一种组合物，其特征在于，所述组合物包含：

3-甲基苯并噻唑酮腙或其盐；和

过氧化物酶。

根据本发明，所述组合物还包含防腐剂。优选地，所述防腐剂为叠氮钠、氟苯尼考或PC-300中的一种或多种。更优选地，所述防腐剂为PC-300和氟苯尼考。

本发明还提供了一种组合物，其特征在于，所述组合物包含：

3-甲基苯并噻唑酮腙或其盐；和

防腐剂。

根据本发明，所述防腐剂为叠氮钠、氟苯尼考或PC-300中的一种或多种。更优选地，所述防腐剂为PC-300和氟苯尼考。

根据本发明，上述组合物在酸性环境中。

根据本发明，优选地，pH值为0.5-4.5，更优选地，pH值为1-4.05。