[发明专利]一种用于确定TCR和抗原相互作用强度的方法在审
| 申请号： | 202210137336.7 | 申请日： | 2022-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN115786439A | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 蓝勋;王莉惠;顾斐;杨晗;张鹏 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N33/68;C12N5/10;C12N1/19;C07K14/725;C07K14/74;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 邰红 |
| 地址： | 100084*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 确定 tcr 抗原 相互作用 强度 方法 | ||
1.一种确定TCR和抗原相互作用强度的方法，其包括：
(a)将展示抗原-MHC复合物(pMHC)的酵母细胞与表达TCR的T细胞共培养；
(b)检测激活表达T细胞活化标志物的T细胞数目比例或者检测所述共培养中所有T细胞的T细胞活化标志物的平均表达量；
由此确定所述抗原与所述TCR的相互作用强度；
其中所述MHC、TCR和T细胞是人源的。
2.一种确定出与特定抗原结合的TCR的方法，其包括：
(a)将展示抗原-MHC复合物(pMHC)的酵母细胞分别与多种表达TCR的T细胞共培养；
(b)检测激活表达T细胞活化标志物的T细胞数目比例或者检测所述共培养中所有T细胞的T细胞活化标志物的平均表达量，由此确定所述抗原与所述TCR的相互作用强度；
(c)根据确定的相互作用强度，确定出与所述特定抗原结合的TCR；
其中所述MHC、TCR和T细胞是人源的。
3.一种培养物，其包含展示抗原-MHC复合物(pMHC)的酵母细胞与表达TCR的T细胞，可用于确定所述抗原与所述TCR的相互作用强度。
4.根据权利要求1或2所述的方法或权利要求3所述的培养物，其中所述的展示pMHC的酵母细胞是以整合形式表达pMHC。
5.根据权利要求1或2所述的方法或权利要求3所述的培养物，其中所述T细胞与所述酵母细胞的数目比例为1:3至3:1，优选1:1至1:3。
6.根据权利要求1或2所述的方法或权利要求3所述的培养物，其中所述T细胞为过表达CD8的T细胞。
7.根据权利要求1或2所述的方法或权利要求3所述的培养物，其中所述T细胞为永生化的T细胞或癌症T细胞，优选癌症T细胞，且更优选地所述癌症T细胞为Jurkat细胞。
8.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述T细胞活化标志物选自CD69、CD25、细胞内杀伤因子如IL-2、TNFα、INFγ，优选为CD69。
9.根据权利要求1或2所述的方法或权利要求3所述的培养物，其中所述酵母是酿酒酵母，优选所述酿酒酵母为EBY100菌株或EBY100菌株的遗传改造菌株。
10.根据权利要求3所述的培养物用于研究TCR与抗原相互作用、确定出针对特定抗原的TCR等用途。
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