[发明专利]一种兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制备方法和用途。本发明中，取干燥的金福菇子实体，用粉碎机打成粉末，过夜后加入按体积的80％的硫酸铵，放置4℃冰箱中12h，之后于超高速离心机中4℃以15000×g的转速离心15min得到沉淀，用3500Da的透析袋透析掉无机盐离子，冻干即为蛋白样品，而后进行液相进行纯化样品，通过体外清除自由基实验发现多肽具有很好的抗氧化活性；通过对ACE抑制实验发现，具有较高的抑制活性。目前查阅资料中，尚未发现该金福菇功能多肽活性的相关报道，其在医药前景十分广阔。

技术领域

本发明属于农产品精深加工技术领域，具体为一种兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制备方法和用途。

背景技术

人类的很多疾病与体内自由基的产生密切相关，这些自由基通过攻击机体组织，造成DNA，蛋白质和膜脂质的氧化损伤，引发一系列的链反应，进而损伤机体的各项器官，造成代谢性损伤。因此寻找新型抗氧化剂，具有重要意义。

目前治疗高血压的药物，如卡托普利，可以有效地抑制ACE的活性,降低血压,但是其有明显的副作用，长期服用会导致降压过度、泌尿系统病变、咳嗽、味觉失真及血管神经性水肿等。因此，ACE抑制剂研究应运而生。ACE抑制剂来源天然，毒性小，吸收好，为治疗高血压提供了另一条出路，目前，ACE抑制剂的研究主要集中在大豆，玉米，海鲜等方面，而关于食用菌子实体分离纯化ACE抑制肽，较少。

食用菌因其具有丰富的营养价值，近几年来，越来越受到科研工作者的重视。随着研究的深入，食用菌多糖诸多生物活性已逐渐被人们认知，如抗氧化、抗病毒、免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、调节肠道菌群、抗疲劳、降血糖、降血脂等。蛋白活性主要集中在抗炎，多肽抗氧化等方面，而关于食用菌多肽兼具抗氧化及ACE抑制活性方面的报道几乎没有。金福菇(Tricholoma lobayense)，担子菌门，伞菌纲，伞菌目，口蘑科，香菇属，又名大白口蘑，是一种正处于开发阶段的高温型珍稀食用菌，基于本实验室对金福菇多糖的研究发现TLH-3具有与Vc活性相当的抗氧化效果并且无毒副作用。而在干重比例中，蛋白的含量仅次于多糖，目前对其研究主要集中于多糖及菌丝体蛋白的生物活性研究，关于子实体功能多肽的相关研究尚无报道，因此金福菇子实体蛋白具有广阔的研究前景。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决上述提出的问题，提供一种兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制备方法和用途。

本发明采用的技术方案如下：一种兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽的制备方法，所述兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及其制备方法包括以下步骤：

S1:取干燥的金福菇子实体，用粉碎机打成粉末；

S2:控制料液比为1:15加入5％的冰醋酸；

S3:控制温度为4℃过夜后加入按体积的80％的硫酸铵，放置4℃冰箱中12h；

S4:之后于超高速离心机中4℃以15000×g的转速离心15min得到沉淀；

S5:用3500Da的透析袋透析掉无机盐离子，冻干即为蛋白样品；

S6:提取的蛋白样品，加入酶，调节缓冲液的pH，酶解时间及温度得到相应的水解样品；

S7:取步骤S5中制得的样品进行分离纯化，用截留量5kDa的超滤膜进行分离，得到5000Da以下的样品，而后进行液相进行纯化样品。

在一优选的实施方式中，所述步骤S1中，5％的冰醋酸中含有0.1％的β-巯基乙醇。

在一优选的实施方式中，所述步骤S6中，酶的为丝氨酸蛋白酶，包括但不限于地衣杆菌蛋白酶、凝血酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶。

在一优选的实施方式中，所述步骤S6中加入酶的量为4％～8％；所述的缓冲液pH为8.5～10.5。