[发明专利]一种处理样本的方法及其核酸提取方法与文库在审
| 申请号: | 202210101853.9 | 申请日: | 2022-01-27 |
| 公开(公告)号: | CN114410744A | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
| 发明(设计)人: | 李妍珂;李全;刘永初;吕佩涛;刘阳;李阳 | 申请(专利权)人: | 深圳安吉康尔医学检验实验室 |
| 主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06;C40B40/06 |
| 代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 周建军;彭家恩 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市龙华区龙华街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 处理 样本 方法 及其 核酸 提取 文库 | ||
一种处理样本的方法及其核酸提取方法与文库,处理样本的方法包括:离心步骤,包括对待测样本进行离心,然后移去上清液,得到离心后的沉淀;漂洗步骤,包括使用缓冲液重悬所述沉淀,然后移去上清液,得到漂洗后的沉淀;过滤步骤,包括使用缓冲液稀释沉淀,过滤,取经过滤膜的液体,即为过滤后的样本。该处理方法显著提高样本的杂质去除效率,显著降低杂质对后续测序的影响,同时有效提升了核酸质量。此外,还可加入核酸保护剂,得到可在2~8℃冷藏条件运输、保存的样本。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种处理样本的方法及其核酸提取方法与文库。
背景技术
尿液样本成分复杂,其中细胞含量较少,且不便于储存,难以获得合格的RNA用于下游的分子生物学检测。而越来越多的研究表明,对尿液上皮细胞中RNA进行有效分析能有助于遗传性疾病的诊断。临床常规的尿液样本采集方式不利于后续核酸提取,且RNA极易降解,样本运输要求较高;而要获得满足分析条件的RNA,尿液样本的采集、保存方式则是首先需要解决的问题。
现有技术主要是从尿液等体液样本中富集外泌体、分离尿蛋白等物质,不涉及对细胞的处理,也不涉及样本保存。
发明内容
根据第一方面,在一实施例中,提供一种处理样本的方法,包括:
离心步骤,包括对待测样本进行离心,然后移去上清液,得到离心后的沉淀;
漂洗步骤,包括使用缓冲液重悬所述沉淀,然后移去上清液,得到漂洗后的沉淀;
过滤步骤,包括使用缓冲液稀释沉淀,过滤,取经过滤膜的液体,即为过滤后的样本。
根据第二方面,在一实施例中,提供第一方面所述方法处理得到的样本。
根据第三方面,在一实施例中,提供一种核酸提取方法,包括:
从第二方面所述样本中提取得到核酸。
根据第四方面,在一实施例中,提供第三方面所述核酸提取方法提取得到的核酸。
根据第五方面,在一实施例中,提供一种测序文库,所述测序文库由第四方面所述核酸构建得到。
依据上述实施例的一种处理样本的方法及其核酸提取方法与文库,该处理方法显著提高样本的杂质去除效率,显著降低杂质对后续测序的影响,同时有效提升了核酸质量。
在一实施例中,还可加入核酸保护剂,得到可在2~8℃冷藏条件运输、保存的样本。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。其中不同实施方式中类似元件采用了相关联的类似的元件标号。在以下的实施方式中,很多细节描述是为了使得本申请能被更好的理解。然而,本领域技术人员可以毫不费力的认识到,其中部分特征在不同情况下是可以省略的,或者可以由其他元件、材料、方法所替代。在某些情况下,本申请相关的一些操作并没有在说明书中显示或者描述,这是为了避免本申请的核心部分被过多的描述所淹没,而对于本领域技术人员而言,详细描述这些相关操作并不是必要的,他们根据说明书中的描述以及本领域的一般技术知识即可完整了解相关操作。
另外,说明书中所描述的特点、操作或者特征可以以任意适当的方式结合形成各种实施方式。同时,方法描述中的各步骤或者动作也可以按照本领域技术人员所能显而易见的方式进行顺序调换或调整。因此,说明书中的各种顺序只是为了清楚描述某一个实施例,并不意味着是必须的顺序,除非另有说明其中某个顺序是必须遵循的。
本文中为部件所编序号本身,例如“第一”、“第二”等,仅用于区分所描述的对象,不具有任何顺序或技术含义。
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