[发明专利]一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法

权利要求书

1.一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)小龙虾壳预处理：

小龙虾壳干燥粉碎，制得虾壳粉；

(2)一次发酵：

使用虾壳粉配置一次发酵培养基，接种乳酸菌、醋酸菌进行发酵，发酵结束后灭菌，得到一次发酵液；

(3)二次发酵：

一次发酵液固液分离，使用固体分离物配置二次发酵培养基，接种枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和红杆菌进行发酵，发酵结束后灭菌，得到二次发酵液；

(4)二次发酵液处理：

二次发酵液固液分离，沉淀水洗、干燥，得到产物。

2.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(1)中，虾壳粉粒度为20-120目。

3.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(2)中，一次发酵培养基组成如下：

虾壳粉40-50/L，葡萄糖5-15g/L，可溶性淀粉5-15g/L，酵母膏6-10g/L，醋酸钠0.3-0.6g/L，硫酸镁0.3-0.6g/L，磷酸二氢钾0.8-1.2g/L，硫酸锰0.04-0.06g/L，pH5.8-6.2，115℃灭菌30min后，加入无水乙醇10-15mL/L。

4.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(2)中，

乳酸菌接种量为一次发酵培养基体积的1-3％，

醋酸菌接种量为一次发酵培养基体积的1-3％。

5.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(2)中，

一次发酵温度32-35℃，转速120-150rpm，发酵30-36h。

6.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(3)中，

二次发酵培养基组成如下：

固体分离物40-50/L，葡萄糖5-10g/L，可溶性淀粉5-10g/L，酵母膏10-15g/L，硫酸镁0.2-0.5g/L，磷酸二氢钾0.8-1.2g/L，硫酸锰0.04-0.06g/L，115℃灭菌30min。

7.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(3)中，

枯草芽孢杆菌接种量为一次发酵培养基体积的1-2％，

地衣芽孢杆菌接种量为一次发酵培养基体积的1-2％，

红杆菌接种量为一次发酵培养基体积的2-4％。

8.根据权利要求1所述的一种两步发酵虾壳制备壳聚糖的方法，其特征在于，

步骤(3)中，

一次发酵温度34-37℃，转速150-180rpm，发酵48-60h。