[发明专利]一种绿僵菌产孢的固体发酵培养方法在审
申请号: | 202210068220.2 | 申请日: | 2022-01-20 |
公开(公告)号: | CN114438010A | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 程东美;何俊烺;梁超鹏;张志祥 | 申请(专利权)人: | 仲恺农业工程学院 |
主分类号: | C12N3/00 | 分类号: | C12N3/00;C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 广州市时代知识产权代理事务所(普通合伙) 44438 | 代理人: | 梁美玲 |
地址: | 510220 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 绿僵菌产孢 固体 发酵 培养 方法 | ||
1.一种绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:包括以下步骤,
S1、将绿僵菌菌种接种到第一固体培养基中进行活化,得到活化的绿僵菌,其中,所述第一固体培养基包括麦芽糖、酵母提取粉、蛋白胨、黄粉虫蜕、琼脂和水;
S2、挑取活化后的绿僵菌孢子或菌苔接种到液体培养基进行液体发酵培养,得到绿僵菌液体发酵产物,其中,所述液体发酵培养包括麦芽糖、酵母提取粉、蛋白胨和水组成;
S3、将绿僵菌液体发酵产物置于由豆渣和谷壳组成的第二固体培养基中以袋料法进行固体发酵,培养的温度为24℃~26℃,培养的湿度为80%~90%,每培养3d后通入空气,共培养为3d~10d直至内外长出绿色孢子,得到绿僵菌粗品。
2.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述第一固体培养基的组分重量配比是:麦芽糖10g~40g、酵母提取粉5g~10g、蛋白胨0g~5g、黄粉虫蜕0g~5g、琼脂15g~20g、水1L。
3.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述液体培养基的组分重量配比是:麦芽糖10g~40g、酵母提取粉5g~10g、蛋白胨5g~10g、水1L。
4.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述第二固体培养基的组分重量份是:豆渣50份~90份,谷壳10份~50份。
5.根据权利要求4所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述第二固体培养基的厚度是1cm~5cm。
6.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述第二固体培养基还添加有补充料,每100g补充料中包含乳糖1g~10g、酵母提取粉0.5g~4g、花生油1mL~2mL和1mL~20mL水。
7.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述S3中,绿僵菌液体发酵产物接种到液体培养基中的接种量为10%~20%。
8.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述S1中,通过以下方式获得活化绿僵菌菌种:所述绿僵菌菌种在25℃下传代培养、活化,直至长满绿色孢子,所述绿色孢子为活化后的绿僵菌孢子。
9.根据权利要求2所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述S2中,液体发酵培养于三角瓶中进行,培养条件为温度23℃~26℃,培养时间为72h~120h,摇床转速为120~150r/min。
10.根据权利要求1所述的绿僵菌产孢的固体发酵培养方法,其特征是:所述第二固体培养基于蒸汽灭菌温度121℃和蒸汽灭菌的时间25min~40min下获得。
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