[发明专利]一种酶制剂及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种酶制剂，其特征在于，所述酶制剂包括：

芯材，其包括壳聚糖纳米粒子和酶，

第一层壁材，其包括海藻酸钠和海藻糖，

第二层壁材，其包括纳晶纤维素，

其中第一层壁材包覆在芯材表面上，第二层壁材包覆在第一层壁材表面上。

2.根据权利要求1所述的酶制剂，其特征在于，所述酶选自葡萄糖氧化酶、木聚糖酶、植酸酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶中的一种或多种。

3.根据权利要求1或2所述的酶制剂，其特征在于，所述壳聚糖与所述酶与的质量比为1～5：0.2～0.5。

4.根据权利要求1或2所述的酶制剂，其特征在于，所述海藻酸钠和所述海藻糖的质量比为10～20：0.1～1。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳晶纤维素的制备方法包括以下步骤：

(1)将微晶纤维素分散于质量分数为50～75％硫酸中，40～60℃强烈机械搅拌8～12h，用4～12倍水稀释反应混合物，使水解反应淬灭；

(2)向步骤(1)中的淬灭的反应混合物，加入质量分数为20～40％的H₂O₂水溶液，反应20～40min后，通过离心分离结晶物；

(3)将结晶物加入水中，用超声波洗涤，离心，以去除多余的酸，然后进行透析，冻干，制备得到纳晶纤维素。

6.权利要求1-5任一项所述的酶制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)芯材的制备：将酶加入到壳聚糖溶液中，加入三聚磷酸钠，壳聚糖与三聚磷酸根离子之间通过离子交联形成附载酶的壳聚糖纳米粒子；

(2)第一层壁材的包覆：将CaCl₂溶液加入到步骤(1)的最终溶液中，混匀，再加入海藻酸钠和海藻糖的混合溶液，海藻酸钠和海藻糖吸附在壳聚糖纳米粒子表面并固化形成第一层壁材，过滤得到单层微胶囊形式的酶制剂；

(3)第二层壁材的包覆：将单层微胶囊形式的酶制剂加入到纳晶纤维素溶液中，纳晶纤维素吸附在第一层壁材表面形成第二层壁材，过滤得到双层微胶囊形式的酶制剂。

7.根据权利要求6所述的酶制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)芯材的制备包括：将壳聚糖溶解于质量浓度为0.5～4％的乙酸溶液中，充分溶解后，得到质量浓度为1～10mg/mL的壳聚糖的溶液，用NaOH溶液调整pH到5.0～6.0后，向其中加入酶，充分溶解后，离心，取上清液，将浓度为0.10～0.50mg/mL的三聚磷酸钠溶液与上清液按照体积比为1:2～8混合，200～400rpm搅拌获得装载酶的壳聚糖纳米粒子的溶液。

8.根据权利要求6所述的酶制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)第一层壁材的包覆包括：将CaCl₂溶液加入到所述装载酶的壳聚糖纳米粒子的溶液中，混匀后，Ca²⁺的最终摩尔浓度为0.5～2mol/L，向其中滴加海藻酸钠和海藻糖的混合溶液，其中固化20～40min，过滤得到单层微胶囊形式的酶制剂，

其中海藻酸钠和海藻糖的混合溶液中，海藻酸钠与海藻糖的质量比为10～20：0.1～1，海藻酸钠的质量浓度为5％～30％，海藻糖的质量浓度为0.5％～4％，

其中海藻酸钠和海藻糖的混合溶液与含Ca²⁺的溶液的体积比为1～5:1。

9.根据权利要求6所述的酶制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)第二层壁材的包覆包括：将所述单层微胶囊形式的酶制剂加入到质量浓度为0.05～5％的纳晶纤维素溶液中，轻轻搅拌0.5～2h，过滤得到双层微胶囊形式的酶制剂。

10.权利要求1-5任一项所述的酶制剂在制备药物、食品和饲料中的用途，所述酶制剂可提高酶在动物胃肠道内的活性。