[发明专利]一种同时鉴别三种牛腹泻病病原的引物组合及RT-LAMP检测方法

权利要求书

1.一种引物组合，其特征在于，由引物组Ⅰ、引物组Ⅱ和引物组Ⅲ组成；

所述引物组Ⅰ包括引物BVDV-F3、引物BVDV-B3、引物BVDV-FIP、引物BVDV-BIP、引物BVDV-Floop、引物BVDV-Bloop、引物BVDV-FD和引物BVDV-BD；

所述引物BVDV-F3的序列如SEQ ID NO.1所示，所述引物BVDV-B3的序列如SEQ ID NO.2所示，所述引物BVDV-FIP的序列如SEQ ID NO.3所示，所述引物BVDV-BIP的序列如SEQ IDNO.4所示，所述引物BVDV-Floop的序列如SEQ ID NO.5所示，所述引物BVDV-Bloop的序列如SEQ ID NO.6所示，所述引物BVDV-FD的序列如SEQ ID NO.7所示，所述引物BVDV-BD的序列如SEQ ID NO.8所示；

所述引物组Ⅱ包括引物BRV-F3、引物BRV-B3、引物BRV-FIP、引物BRV-BIP、引物BRV-Floop、引物BRV-Bloop、引物BRV-FD和引物BRV-BD；

所述引物BRV-F3的序列如SEQ ID NO.9所示，所述引物BRV-B3的序列如SEQ ID NO.10所示，所述引物BRV-FIP的序列如SEQ ID NO.11所示，所述引物BRV-BIP的序列如SEQ IDNO.12所示，所述引物BRV-Floop的序列如SEQ ID NO.13所示，所述引物BRV-Bloop的序列如SEQ ID NO.14所示，所述引物BRV-FD的序列如SEQ ID NO.15所示，所述引物BRV-BD的序列如SEQ ID NO.16所示；

所述引物组Ⅲ包括引物ETEC-F3、引物ETEC-B3、引物ETEC-FIP、引物ETEC-BIP、引物ETEC-Floop、引物ETEC-Bloop、引物ETEC-FD和引物ETEC-BD；

所述引物ETEC-F3的序列如SEQ ID NO.17所示，所述引物ETEC-B3的序列如SEQ IDNO.18所示，所述引物ETEC-FIP的序列如SEQ ID NO.19所示，所述引物ETEC-BIP的序列如SEQ ID NO.20所示，所述引物ETEC-Floop的序列如SEQ ID NO.21所示，所述引物ETEC-Bloop的序列如SEQ ID NO.22所示，所述引物ETEC-FD的序列如SEQ ID NO.23所示，所述引物ETEC-BD的序列如SEQ ID NO.24所示。

2.如权利要求1所述的引物组合，其特征在于：

所述引物BVDV-FIP和引物BVDV-BIP的5’端连接有淬灭基团BHQ1；所述引物BRV-FIP和引物BRV-BIP的5’端连接有淬灭基团BHQ2；所述引物ETEC-FIP和引物ETEC-BIP的5’端连接有淬灭基团BHQ3；

所述引物BVDV-FD和引物BVDV-BD的3’端连接有荧光基团ALEXA FLUOR 488；所述引物BRV-FD和引物BRV-BD的3’端连接有荧光基团CY3；所述引物ETEC-FD和引物ETEC-BD的3’端连接有荧光基团CY5。

3.权利要求1或2所述的引物组合的应用，为如下(a1)至(a6)中的任一种：

(a1)鉴别牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和产肠毒大肠杆菌；

(a2)制备用于鉴别牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和产肠毒大肠杆菌的试剂盒；

(a3)检测待测病原微生物是否为牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒或产肠毒大肠杆菌；

(a4)制备用于检测待测病原微生物是否为牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒或产肠毒大肠杆菌的试剂盒；

(a5)检测待测样本中是否含有牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒或产肠毒大肠杆菌；

(a6)制备用于检测待测样本中是否含有牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒或产肠毒大肠杆菌的试剂盒；

所述应用为在非疾病诊断和治疗中的应用。

4.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1或2所述的引物组合。