[发明专利]一种智能光控CRISPR纳米载体及其制备方法

权利要求书

1.一种智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，包括阳离子聚合物/相变材料核壳结构和CRISPR基因编辑系统，所述CRISPR基因编辑系统附着于阳离子聚合物/相变材料核壳结构中，所述智能光控CRISPR纳米载体的粒径为30～200nm；

所述阳离子聚合物/相变材料核壳结构包括光热剂、相变材料、阳离子聚合物。

2.如权利要求1所述的智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，所述阳离子聚合物/相变材料核壳结构与CRISPR基因编辑系统的用量比为1～30:1。

3.如权利要求1所述的智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，所述光热剂为吲哚菁绿、碘化物、石墨烯量子点、黑磷量子点、硒量子点、金纳米颗粒及其复合物中的至少一种。

4.如权利要求1所述的智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，所述相变材料为有机脂肪酸，包括天然脂肪酸或者人工合成脂肪酸。

5.如权利要求1所述的智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，所述阳离子聚合物为聚丙烯氯化铵、L-多聚赖氨酸、聚乙烯亚胺、D-多聚赖氨酸、阳离子聚丙烯酰胺、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、壳聚糖和脂质体中的至少一种。

6.如权利要求1所述的智能光控CRISPR纳米载体，其特征在于，所述CRISPR基因编辑系统为CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas13a、CRISPR/Cas12a中的至少一种。

7.一种智能光控CRISPR纳米载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备光响应芯材：提供相变材料并溶于有机溶剂，制得第一有机溶液，所述第一有机溶液中相变材料的浓度为1～10mg/ml；提供光热剂并溶于有机溶剂，制得第二有机溶液，所述第二有机溶液中光热剂的浓度为1～5mg/ml；将第一有机溶液与第二有机溶液混合制得光响应芯材；

制备聚合物壳材：提供阳离子聚合物并溶于去离子水中，继续向去离子水中添加CRISPR基因编辑系统，制得阳离子聚合物的浓度为5～50mg/ml、CRISPR基因编辑系统的浓度为0.1～1mg/ml的溶液，即为聚合物壳材；

制备智能光控CRISPR纳米载体：将光响应芯材与聚合物壳材按照体积比为2～8:2～8的配比混匀，透析、冷冻、干燥，制得智能光控CRISPR纳米载体。

8.如权利要求7所述的智能光控CRISPR纳米载体的制备方法，其特征在于，在制备光响应芯材步骤中，所述相变材料为月桂酸与硬脂酸的混合物，所述光热剂为吲哚菁绿；

所述有机溶剂为丙酮、异丙醇、四氢呋喃、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜中的至少一种。

9.如权利要求7所述的智能光控CRISPR纳米载体的制备方法，其特征在于，在制备聚合物壳材步骤中，所述阳离子聚合物为聚乙烯亚胺，所述CRISPR基因编辑系统为CRISPR/Cas9。

10.如权利要求7所述的智能光控CRISPR纳米载体的制备方法，其特征在于，在制备智能光控CRISPR纳米载体步骤中，所述光响应芯材与聚合物壳材的体积比为5:5。