[发明专利]一种胶原三肽及其酶法制备方法

说明书

本发明公开了一种胶原三肽及其酶法制备方法，该酶法制备方法包括：以罗非鱼鱼皮为原料，通过添加内切蛋白酶控制酶解，灭酶，再添加解淀粉芽孢杆菌蛋白酶进一步控制酶解处理，灭酶，冷冻干燥制备得到。本发明的优点在于：(1)采用本发明酶法制备方法制备出的罗非鱼鱼皮胶原三肽不具有明显苦味；(2)本发明原料来源于动物蛋白，价格便宜；(3)本发明工艺简单易于产业化生产，成本低。

技术领域

本发明属于鱼类加工副产物的深加工领域，具体涉及一种胶原三肽及其酶法制备方法。

技术背景

鱼皮胶原蛋白属于Ⅰ型胶原蛋白，Ⅰ型胶原蛋白是由一条α1链(G9M6I5)和2条α2链(G9M6I6)三螺旋组成。胶原蛋白分子长约300nm、直径约1.5nm，由3条肽链以平行、右旋的形式缠绕而成，组成胶原蛋白的a肽链自身为左手螺旋结构。每条肽链的序列特征表现为每隔两个其它氨基酸残基即有一个甘氨酸，每条肽链的序列特征为Gly-X-Y的重复序列， X主要为脯氨酸(Pro)，Y一般为羟脯氨酸(Hyp)和丙氨酸(Ala)。

水解制备多肽是水产品高价值全面再利用的一个重要途径，胶原蛋白的提取方法有酸碱提取法、酶提取法和热水提取法，其生产出的多肽具有美容，止血，抑菌以及利于人体吸收等功效。酶解法制备多肽具有专一性、反应时间短，反应条件温和以及操作简单的优点，适用于大规模酶解生产制备小分子胶原蛋白肽。

胶原蛋白通过蛋白酶水解可得到多种胶原蛋白肽。周先艳研究发现经碱性蛋白酶酶解鳕鱼皮胶原蛋白，其酶解液透过Caco-2细胞的寡肽的一级结构中有7条含有GPA序列，5条含有GPS序列，5条含有GPR序列(周先艳.鳕鱼皮胶原蛋白水解液体外模拟消化研究及抗氧化肽的分离纯化[D].昆明理工大学,2016)；同样艾丽奇用碱性蛋白酶处理后也得到GPA肽段，并验证了GPA具有潜在抗光老化的活性(艾丽奇.鳕鱼皮胶原蛋白肽的抗皮肤光老化功效及其作用机制研究[D].华南理工大学)；Wang从猪、牛、罗非鱼、母鸡表皮经木瓜蛋白酶酶解制备的胶原蛋白水解物中鉴别出了多个肽段富含Gly-Pro-Hyp序列，并且可减轻经UVA诱导的人体真皮成纤维细胞损伤(Xiangfeng Wang,Hui Hong,Jianping Wu.Hen collagenhydrolysate alleviates UVA-induced damage in human dermal fibroblasts[J].Journal of Functional Foods,63)。