[发明专利]一种肿瘤抗原/MHC-I复合物及其制备方法和用途

权利要求书

1.肿瘤抗原/MHC-I复合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

对肿瘤细胞进行裂解，得到肿瘤细胞裂解物，所述肿瘤细胞裂解物含有肿瘤抗原/MHC-I复合物；

将负载有抗体的载体与所述肿瘤细胞裂解物混合处理，得到所述肿瘤抗原/MHC-I复合物；其中，所述肿瘤抗原/MHC-I复合物负载于所述载体上，所述抗体与所述肿瘤抗原/MHC-I复合物中的MHC-I特异性结合。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括从负载有所述肿瘤抗原/MHC-I复合物的载体中分离所述肿瘤抗原/MHC-I复合物的步骤。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，以细胞裂解液对所述肿瘤细胞进行裂解；优选地，所述细胞裂解液包括3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐、Tris缓冲液和NaCl。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述抗体为MHC-Iβ链抗体；优选地，所述抗体标记有第一标记物，所述第一标记物选自生物素和/或第一化学偶联物。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述载体为磁珠和/或量子点荧光微球；优选地，所述载体标记有第二标记物，所述第二标记物选自亲和素和/或第二化学偶联物。

6.一种肿瘤抗原/MHC-I复合物，其特征在于，通过权利要求1-5任一项所述制备方法制备得到。

7.权利要求6所述肿瘤抗原/MHC-I复合物在体外富集肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞、刺激相同来源肿瘤浸润淋巴细胞的活化、增殖和/或制备治疗肿瘤的药物中的用途。

8.一种体外富集肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：

将权利要求6所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触，所述肿瘤浸润淋巴细胞中的肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞与所述肿瘤抗原/MHC-I复合物结合，得到结合物，所述结合物富集有所述肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与标记有生物素的抗体结合并共同负载于标记有亲和素的载体上，并且，在所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触之前，所述肿瘤浸润淋巴细胞中添加有亲和素。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，在所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触之前，所述肿瘤浸润淋巴细胞中还添加有酪氨酸激酶抑制剂；优选地，所述酪氨酸激酶抑制剂为达沙替尼。

11.根据权利要求8-10任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括从所述结合物中分离所述肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞的步骤。

12.一种肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞，其特征在于，通过权利要求8-11任一项所述方法制备得到。

13.一种体外刺激相同来源肿瘤浸润淋巴细胞的活化、增殖的方法，其特征在于，所述方法包括：

将权利要求6所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，将权利要求6所述肿瘤抗原/MHC-I复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触的步骤中，还添加有细胞因子；优选地，所述细胞因子选自4-1BB、IL-2、IL-21中的至少一种。