[发明专利]一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖制备方法及其在调节肠道微生物菌群与降血糖应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体公开了一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖制备方法及其在调节肠道微生物菌群与降血糖应用。本发明的白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖可作为益生元，不仅能调节糖尿病小鼠肠道细菌菌群结构，提高肠道乳杆菌、毛螺菌、粪杆菌、拟杆菌等菌群的相对丰度，减少产芽孢杆菌、弯曲杆菌以及肠杆菌的相对丰度，同时可调节真菌菌群结构，降低担子菌门与子囊菌门的数量比值，降低曲霉属及被孢霉属等促炎症的真菌的相对丰度，提高青霉属和白念珠属的相对丰度。另外，所述的白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖均可改善小鼠胰岛素水平、糖化血红蛋白水平及胰岛β细胞的功能以起到改善糖尿病小鼠血糖的作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖制备方法及其在调节肠道微生物菌群与降血糖应用。

背景技术

白蜡多年菌(Perenniporiafraxinea)隶属于担子菌门(Basidiomycotina)伞菌纲(Agaricomycetes)多孔菌目(Polyporales)多孔菌科(Polyporaceae)多年卧孔菌属(Perenniporia)，是一种极具药用价值的药用真菌。白蜡多年菌中含有多种生理活性成分，其中包括多糖、多酚、纤溶蛋白酶等。有研究表明，白蜡多年菌具有抗肿瘤作用及抗氧化活性，但对于白蜡多年菌多糖的提取方法及药用价值的研究相对较少。

肠道中的细菌、古细菌和结肠真菌等统称为“肠道微生物”。胃肠道中的微生物数量超过10¹⁴种，构成了肠粘膜屏障，在营养物质的摄取和代谢、免疫组织的成熟以及防止病原微生物繁殖方面具有重要调节作用，健康的肠道微生物群对宿主的整体健康负有很大的责任。相反，肠道菌群的失调可能参与了一些疾病的发展，例如：肥胖、哮喘、腹腔疾病、Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病、炎症性肠病(克罗恩病、溃疡性结肠炎)、肠易激综合征、艰难梭菌感染、艾滋病毒感染、结直肠癌、肾结石和牙周炎等等。

随着城市化和发展以及人们饮食结构的改变，Ⅱ型糖尿病(type 2diabetesmellitus，T2DM)及其并发症已成为危害人类健康的主要疾病之一。注射胰岛素及口服降糖药是目前较为有效的控制血糖的治疗方式，然而，它们有明显的副作用，包括低血糖和胃肠道问题。因此，迫切需要有效的替代品来减少糖尿病的并发症和较低的副作用。近年来，寻找对抗糖尿病的替代药品得到了极大关注。越来越多的研究表明，食药用真菌多糖功效明显，并且具有预防和治疗T2DM的作用，是天然的降血糖物质。

目前尚未发现关于白蜡多年(卧孔)菌多糖影响肠道微生物菌群来发挥降血糖作用的研究。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖的制备方法。该方法稳定可靠、实用性强。

本发明的另一目的在于提供所述方法制备得到的白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖。

本发明的再一目的在于提供所述的白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖在制备对肠道益生菌具有促增殖作用，促进肠道短链脂肪酸产量，调节肠道菌群结构，和/或降血糖的产品中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖的制备方法，包含如下步骤：

(1)将白蜡多年菌菌种接种于液体培养基中进行发酵培养，固液分离，得到白蜡多年菌发酵液和菌丝体，将白蜡多年菌发酵液浓缩备用；

(2)将步骤(1)中得到的白蜡多年菌菌丝体烘干、粉碎过筛，得到菌丝体粉末；然后加入石油醚进行脱脂处理，烘干，得到白蜡多年菌菌丝体干粉；

(3)将步骤(2)中得到的白蜡多年菌菌丝体干粉加入到水中，进行热水浸提，得到白蜡多年菌浸提液；然后将其浓缩，得到白蜡多年菌浸提浓缩液；