[发明专利]一种OVA淀粉样蛋白原纤维及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种OVA淀粉样蛋白原纤维及其制备方法与应用。属于生物医学工程材料领域。一种OVA淀粉样蛋白原纤维的制备方法，包括如下步骤：(1)将卵清蛋白(OVA)溶于稀盐酸中，透析，冷冻干燥，得到海绵状的OVA冻干样品；(2)将海绵状的OVA冻干样品溶于稀盐酸中，加入NaCl，调节pH至2，得到混合溶液；将混合溶液于密封条件下水浴加热，终止反应，得到OVA淀粉样蛋白原纤维。本发明通过抗原卵清蛋白组装结构发生变化，实现了免疫效果的增强的目的。本发明制备的OVA淀粉样蛋白原纤维具有低成本、无添加剂的优点，为疫苗的设计提供了新的思路。

技术领域

本发明属于生物医学工程材料领域，特别涉及一种OVA淀粉样蛋白原纤维及其制备方法与应用。

背景技术

在疫苗的研发过程中，设计出能够有效刺激人体免疫系统，引发保护性或治疗性免疫应答的疫苗，并同时兼顾安全性，是首要目的。为了实现这一目的，疫苗构建方法的不断优化显得尤为重要。抗原以及递送载体是疫苗极为重要的组成部分，也是当前疫苗领域的研究热点。

卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)，是目前各类疫苗的相关研究中常用的模型蛋白抗原。在现有的大量关于纳米疫苗构建的研究中，通常借助各类递送载体负载OVA，同时辅以各类免疫佐剂，从而构建出多组分工程化纳米疫苗。尽管大部分被报道的这一类纳米疫苗能够在诱导免疫应答预防疾病甚至治疗癌症方面取得一定的效果，但加入多种疫苗载体和佐剂的多组分疫苗设计往往过于复杂而难以标准化和产业化。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种OVA淀粉样蛋白原纤维的制备方法。

本发明的另一目的在于提供通过上述制备方法制备得到的OVA淀粉样蛋白原纤维。

本发明的再一目的在于提供上述OVA淀粉样蛋白原纤维的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种OVA淀粉样蛋白原纤维的制备方法，包括如下步骤：

(1)将卵清蛋白(OVA)溶于稀盐酸中，透析，冷冻干燥，得到海绵状的OVA冻干样品；

(2)将海绵状的OVA冻干样品溶于稀盐酸中，加入NaCl，调节pH至2，得到混合溶液；将混合溶液于密封条件下水浴加热，终止反应，得到OVA淀粉样蛋白原纤维。

步骤(1)中，所述的稀盐酸的pH值优选为1～5；更优选为2。

步骤(1)中，所述的卵清蛋白在卵清蛋白和稀盐酸形成的体系中的质量浓度优选为1～10％。

步骤(1)中，所述的透析所用的透析袋的截留分子量优选为3000～6000D；更优选为3000D。

步骤(1)中，所述透析的条件优选为4℃透析6～8天；更优选为4℃透析7天。

步骤(2)中，所述的稀盐酸的加入量优选为海绵状的OVA冻干样品和稀盐酸质量的1～3％(w/w)；更优选为海绵状的OVA冻干样品和稀盐酸质量的2％(w/w)。

步骤(2)中，所述的氯化钠在混合溶液中的终浓度为30～70mM；更优选为50mM。

步骤(2)中，所述的调节pH至2的试剂优选为稀盐酸或NaOH。

步骤(2)中，所述的水浴加热的温度优选为40～70℃；更优选为60℃。

步骤(2)中，所述的水浴加热的时间优选为6～48h；更优选为24h。

步骤(2)中，所述的终止反应的方法优选为将混合溶液置于冰水混合物中终止反应。

一种OVA淀粉样蛋白原纤维，通过上述制备方法制备得到。