[发明专利]一种阿尔兹海默症的基因诊断试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种阿尔兹海默症的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

用于扩增如下基因的CDS区域的引物组：APP、APOE、PSEN1、PSEN2、ADAM10、PLD3、APBB2、HFE、NOS3、PAXIP1、PLAU、SORL1、A2M、BLMH、MPO、ACE和MAPT；

所述用于扩增如下基因的CDS区域的引物组包括多重PCR引物组和桥式PCR引物组；

所述桥式PCR引物组包括I5 index引物组和I7index引物组，所述I5 index引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-NO.40所示；所述I7 index引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.41-NO.150所示。

所述多重PCR引物组包括KSGene-A Mix和KSGene-B Mix，所述KSGene-A Mix的核苷酸序列如SEQ ID NO.151-NO.578所示；所述KSGene-B Mix的核苷酸序列如SEQ ID NO.579-NO.1006所示。

2.根据权利要求1所述的阿尔兹海默症的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括EnzymeHT酶。

3.根据权利要求1所述的阿尔兹海默症的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述多重PCR引物组的扩增体系包括KSGene-A Mix:8μL(或KSGene-B Mix:8μL)，EnzymeHT:10μL，基因组DNA，上样量20-200ng(体积根据实际浓度计算)，dd H₂O补足至30μL，KSGene-A Mix和KSGene-B Mix，分A\B两管扩增。

4.根据权利要求1所述的阿尔兹海默症的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述桥式PCR引物组的扩增体系包括EnzymeHT:10μL，I5 index引物组的引物1μL，I7index引物组的引物1μL，dd H₂O:18μL。

5.一种权利要求1-4任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述方法包括：

提取并获得外周血基因组DNA；

将多重PCR引物组对所述外周血基因组DNA进行多重PCR反应，后纯化，获得靶区域PCR产物；

将桥式PCR引物组对所述靶区域PCR产物进行桥式PCR，后纯化，获得文库；

将所述文库混合后上机测序，获得测序结果；

将所述测序结果与各基因的CDS区域碱基进行比对，判断有无突变。

6.一种权利要求1-4所述的试剂盒在检测阿尔茨海默病风险基因位点中的应用。