[发明专利]一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒及应用在审
申请号: | 202111613785.6 | 申请日: | 2021-12-27 |
公开(公告)号: | CN115386654A | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 许小锋;沈杲 | 申请(专利权)人: | 合肥诺为尔基因科技服务有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人: | 卫青松 |
地址: | 230000 安徽省合*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 raa 等温 扩增 方法 病毒 检测 试剂盒 应用 | ||
1.一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒,其特征在于:
包括ORF1ab-F、ORF1ab-R、ORF1ab-P、A buffer、B buffer和包含有ORF1ab基因碱基序列的质粒,作为阳性质控品;
其中ORF1ab为针对于检测位点包含病毒基因组中的保守基因序列,ORF1ab-F为cDNA正向引物序列,ORF1ab-R为cDNA逆向引物序列,ORF1ab-P为包含有ORF1ab的等温扩增引物探针组合。
2.根据权利要求1所述一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒,其特征在于:包含有ORF1ab基因碱基序列的质粒,其对应的碱基序列为:
ATAACAGTTACACCGGAAGCCAATATGGATCAAGAATCCTTTGGTGGTGCATCGTGTTGTCTGTACTGCCGTTGCCACATAGATCATCCAAATCCTAAAGGATTTTGTGACTTAAAAGGTAAGTATGTACAAATACCTACAACTTGTGCTAATGACCCTGTGGGTTTTACACTTAAAAACACAGTCTGTACCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGGCTGTAGTTGTGATCAACTCCGCGAACCCATGCTTCAGTCAGCTGATGCACAATCGTTTTTAAACGGGTTTGCGGTGTAAGTGCAGCCCGTCTTACACCGTGCGGCACAGGCACTAGTACTGATGTCGTATACAGGGCTTTTGACATCTACAATGATAAAGTAGCTGGTTTTGCTAAA。
3.根据权利要求2所述一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒,其特征在于:所述ORF1ab-F、ORF1ab-R对应的引物序列为:
ORF1ab-F 5'-CCGTTGCCACATAGATCATCCAAATCCTAAAGG-3'
ORF1ab-R 5'-TGTAAGACGGGCTGCACTTACACCGCAAAC-3'。
4.根据权利要求2或3所述一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒,其特征在于:所述ORF1ab-P引物序列为:5'-GTGATCAACTCCGCGAACCCATGCTTCAG[FAM-dT]C[THF]GC[BHQ1-dT]GATGCACAATCG-C3-3';其中,FAM表示羧基荧光素标记,THF表示四氢呋喃连接子形成缺刻,BHQ1表示淬灭基团修饰,3’末端标记C3表示Spacer C3修饰基团。
5.根据权利要求4所述一种基于RAA等温扩增方法的新冠病毒检测试剂盒,其特征在于:A Buffer为20%PEG,B Buffer为280mM MgAc。
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